高效阴离子交换色谱脉冲安培检测法同时测定生物转化样品中的海藻糖.PDF

２０１４年１２月 Ｖｏｌ．３２ Ｎｏ．１２ Ｄｅｃｅｍｂｅｒ ２０１４ ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ １４００～１４０３ 技术与应用 ＤＯＩ：１０．３７２４／ ＳＰ．Ｊ．１１２３．２０１４．０７０３７ 高效阴离子交换色谱⁃脉冲安培检测法同时测定 生物转化样品中的海藻糖、葡萄糖和麦芽糖 徐　 颖，　 臧　 颖，　 姜　 婷，　 郑兆娟，　 欧阳嘉∗ （南京林业大学化学工程学院，江苏 南京 ２１００３７） 摘要：建立了高效阴离子交换色谱⁃脉冲安培电化学检测法同时测定生物转化样品中海藻糖、葡萄糖和麦芽糖的分 ＴＭ × 析方法。 选用ＣａｒｂｏＰａｃ １０色谱柱（２５０ ｍｍ ２ ｍｍ）对分离条件进行优化，使用标准样品测定了线性范围和工作 曲线，柱温为３０ ℃，流速为０３０ ｍＬ／ ｍｉｎ，以氢氧化钠溶液和醋酸钠溶液为流动相进行梯度洗脱，脉冲安培法进行 检测。 研究结果表明，该方法可在 １５ ｍｉｎ 内实现海藻糖生物转化液中３种糖的快速定量分析。 海藻糖、葡萄糖和 麦芽糖峰面积与质量浓度的线性关系良好，检出限为００１０～０１００ ｍｇ／ Ｌ。 将此方法用于酶法制备海藻糖的检测， 加标回收率为８９４０％～１０３２％。 在生物转化样品中检测到海藻糖浓度为 １０１０８４ ｇ／ Ｌ，转化率达到了５０５％。 该 方法灵敏度高，简便快速，可应用于海藻糖制备样品中各种成分的分离和定量检测。 关键词：高效阴离子交换色谱；海藻糖；葡萄糖；麦芽糖；生物转化样品 中图分类号：Ｏ６５８　 　 　 文献标识码：Ａ　 　 　 文章编号：１０００⁃８７１３（２０１４）１２⁃１４００⁃０４ Ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｔｒｅｈａｌｏｓｅ，ｇｌｕｃｏｓｅ ａｎｄ ｍａｌｔｏｓｅ ｉｎ ｂｉｏｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｓａｍｐｌｅｓ ｂｙ ｈｉｇｈ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ａｎｉｏｎ ｅｘｃｈａｎｇｅ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ｗｉｔｈ ｐｕｌｓｅｄ ａｍｐｅｒｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ＸＵ Ｙｉｎｇ，ＺＡＮＧＹｉｎｇ，ＪＩＡＮＧ Ｔｉｎｇ，ＺＨＥＮＧ Ｚｈａｏｊｕａｎ，ＯＵＹＡＮＧＪｉａ∗ （Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ ＣｈｅｍｉｃａｌＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｎａｎｊｉｎｇ Ｆｏｒｅｓｔｒｙ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｊｉｎｇ ２１００３７，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａｎ ａｎａｌｙｔｉｃａｌ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｒｅｈａｌｏｓｅ，ｍａｌｔｏｓｅ，ａｎｄ ｇｌｕｃｏｓｅ ｉｎ ｂｉｏｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｓａｍｐｌｅｓ ｗａｓ ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ ｂｙ ｕｓｉｎｇ ｈｉｇｈ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ａｎｉｏｎ ｅｘｃｈａｎｇｅ ｃｈｒｏｍａ⁃ ｔｏｇｒａｐｈｙ ｃｏｕｐｌｅｄｗｉｔｈｐｕｌｓｅｄａｍｐｅｒｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎ （ＨＰＡＥＣ⁃ＰＡＤ）．Ｔｈｅａｎａｌｙｓｉｓｗａｓｐｅｒｆｏｒｍｅｄｏｎ ＴＭ × ａ ＣａｒｂｏＰａｃ １０ ｃｏｌｕｍｎ （２５０ ｍｍ ２ ｍｍ） ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｇｒａｄｉｅｎｔ ｅｌｕｔｉｏｎ ｏｆ ＮａＯＨ⁃ＮａＡｃ ａｓ ｔｈｅ ｍｏｂｉｌｅｐｈａｓｅ． Ｔｈｅ ｃｏｌｕｍｎ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｗａｓ ｓｅｔ ａｔ ３０ ℃，ｔｈｅ ｆｌｏｗ ｒａｔｅ ｗａｓ ０３０ ｍＬ／ ｍｉｎ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌ