汉族马凡综合征患者基因突变及临床特征的研究-临床检验诊断学专业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 目 录 中文摘要………………………………………………………………3 英文摘要………………………………………………………………5 前 言………………………………………………………………7 材 料………………………………………………………………10 方 法………………………………………………………………13 结 果………………………………………………………………25 讨 论………………………………………………………………32 结 论………………………………………………………………39 参考文献………………………………………………………………40 致 谢………………………………………………………………43 综 述………………………………………………………………44 参考文献………………………………………………………………47 缩略词表………………………………………………………………49 3 汉族马凡综合征患者基因突变及临床特征的研究 【摘要】 目的 对 汉 族马 凡综 合 征（ Marfan syndrome ， MFS ） 患 者 的原 纤维 蛋白 － 1 （fibrillin-1，FBN1）基因，转化生长因子受体 1（Transforming Growth Factor Beta Receptor Type Ⅰ，TGFBR1）和转化生长因子受体 2（Transforming Growth Factor Beta Receptor Type Ⅱ，TGFBR2）进行基因突变筛查，明确相应 MFS 患者的发 病原因，并研究其临床特征。 方法 提取 29 例汉族 MFS 患者的基因组 DNA，PCR 扩增 FBN1 的 65 个外显子， TGFBR1 的 9 个外显子，TGFBR2 的 7 个外显子，应用 DHPLC-DNA 测序方法 检测基因突变，对未发现突变的病人，应用多重连接探针扩增技术(Multiplex Ligation-dependent Probe Amplification；MLPA)检测 FBN1 和 TGFBR2 是否存在 缺失突变。 结果 1、在 29 例 MFS 患者中发现 12 种 FBN1 基因突变，其中有 7 种错义突变， 2 种无义突变，2 种剪切位点突变，1 种移码突变。12 种突变中，有 8 种为新发 现的突变，分别为 2359AT (S787C)、3380GT ( G1127V)、4151TC (M1384T)、 4244GA(C1415Y)、6071GT (C2024F)、IVS2+1GT、IVS37+5GA 和 7970 CG+7971 delC；在 FBN1 中发现 11 种多态性，其中 6 种为新发现的多态性： IVS43-30delCCT、IVS45-63GT 、IVS47-28CT、IVS52+127TC、IVS52-23GC、 IVS57+63AC。 2、TGFBR1 发现 4 种多态性，其中 3 种为新发的多态性：IVS6+109AC、 1032TC(N344N)和 1216TC(L406L)；TGFBR2 发现 4 个多态性均已报道。 3.、MLPA 未检测出 FBN1 和 TGFBR2 的缺失突变。 4、本研究小组 2004 年至今共发现的 25 例汉族 MFS FBN1 突变患者。临床 表现的比较分析显示：本组 MFS 患者骨骼系统主要标准发生率和晶状体异位发 生率低于西方 MFS 患者（12% vs 32%；P 0.05 和 12% vs 54%；P0.01），升主 动脉夹层发生率高于西方 MFS 患者(48% vs 14%；p0.01)。 4 结论 1、DHPLC-DNA 测序是一种快速有效的 FBN1 突变检测法，可用于 MFS 的 基因诊断； 2、FBN1 基因突变可能是 12 例 MFS 患者的致病因素； 3、汉族 MFS 患者与西方 MFS 患者的临床表现存在某些差异。 [关键词] 马凡综合征，原纤维蛋白－1 ， 基因突变，变性高效液相色谱分析，多重 连接探针扩增 5 Investigation on gene mutations and clinical features of Marfan syndrome among Han population [Abstract] Objective The purpose of this study was to detect mutations in fibrillin-1 (FBN1), transforming growth factor beta receptor typeⅡ(TGFBR2) and transforming growth factor beta receptor ty