海带多途径抗动脉粥样硬化作用机制研究-药剂学专业论文.docxVIP

海带多途径抗动脉粥样硬化作用机制研究学位论文完成日期：丝鉴辱墨＆，犀 海带多途径抗动脉粥样硬化作用机制研究 学位论文完成日期：丝鉴辱墨＆，犀 指导教师签字： 答辩委员会成员签字： 万方数据 IIIIII IIIIII I It]ll II IIIIIIII III Ul Y2774364 青岛科技大学研究生学位论文 海带多途径抗动脉粥样硬化作用机制研究 摘要 随着社会经济的发展以及人类生活方式的转变，心脑血管疾病已经成为危 害人类健康的首位杀手，而动脉粥样硬化是诱发心脑血管疾病的主要原因，因 此，目前抗动脉粥样硬化药物或保健品的筛选是研究的热点。由于化学合成药 物存在着不良反应明显等缺点，从中药或药食同源植物中筛选抗动脉粥样硬化 活性成分逐渐引起人们的关注。海带具有较高的营养价值，现代药理学研究表 明，海带具有一定的抗动脉粥样硬化作用，但海带中各成分在抗动脉粥样硬化 中所起的作用尚未见系统的研究报道。本课题以海带为研究对象，在对其主要 成分多糖、多酚、不饱和脂肪酸的提取、分离、纯化的基础上，进一步研究了 海带各成分的主要生物活性，从不同角度探究海带多途径发挥抗动脉粥样硬化 作用的机制。主要研究内容及结果如下： 设计了海带综合提取方案，按海带各成分极性的不同，选择合适的溶剂顺 次提取其中的不饱和脂肪酸、多酚和多糖，并对海带多酚和多糖的提取、分离 和纯化做了进一步的研究。 以海带总多酚提取率为指标，通过单因素实验并结合正交设计，得到了超 声提取海带多酚的最优工艺参数。结果表明：采用料液比1：15(g／mL)，提取 温度30℃、溶剂乙醇浓度70％，提取时间40 min，此时海带多酚的最佳提取 率为2．55％，具有良好的重复性。利用海带总多酚中各组分的溶解特性，采用 AB．8型大孔树脂吸附、梯度洗脱的方法对其进行分离和纯化，结合紫外光谱 及薄层色谱，将多酚分为了5个组分，分别为Frl、Fr2、Fr3、Fr4，Fr5。 以海带总多糖提取率为指标，通过单因素实验并结合正交设计，得到了海 带多糖的最佳提取工艺，其参数为：提取次数为2次，提取温度为100℃、 料液比为l：40(g／mL)、提取时间为1 h，在此条件下得到的海带多糖提取率 达7．24％，且具有良好重复性。通过热水提取、乙醇沉淀后得到的海带总多糖， 在使用木瓜蛋白酶．Sevag法去除蛋白质后，利用无水CaCl2及十六烷基三甲基 溴化铵(CTAB)沉淀法将海带多糖分为了褐藻酸钙、褐藻淀粉和褐藻糖胶三 个组份。 万方数据 海带多途径抗动脉粥样硬化作用机制研究以动脉粥样硬化的发生机制为出发点，对分离纯化出的海带各组分进行了 海带多途径抗动脉粥样硬化作用机制研究 以动脉粥样硬化的发生机制为出发点，对分离纯化出的海带各组分进行了 抗氧化、降血脂以及抗炎活性的研究。 抗氧化活性主要考察清除DPPH·及·OH的能力和抗脂质过氧化能力。除 褐藻酸钙及Frl、Fr2组分外，海带中其他组份均对DPPH·及·OH有一定的清 除作用，且清除自由基的能力与样品浓度有一定的量效关系，其中，海带总多 糖成分的清除DPPH·及·OH能力最强，在浓度为5．0 mg／mL时，其对DPPH· 以及·OH的清除率可分别达19．85％和25．93％；利用硫代巴比妥酸(TBARs) 法测定海带各组分抑制亚油酸氧化程度的实验结果表明，海带各组分中，褐藻 糖胶的抗亚油酸氧化能力最强，对亚油酸氧化的抑制率最高达53．1％且作用时 间持久达l 0天以上。 以体外结合牛磺胆酸钠能力考察其降血脂能力实验结果表明，除褐藻酸钙 及Frl、Fr2组分外，海带中其他组份均有一定的体外结合牛磺胆酸钠的能力， 即具有降血脂的作用，其中以海带总多糖的降血脂能力最强，其与牛磺胆酸钠 的结合率可高达26．89％。 抗炎实验结果表明，海带多糖和不饱和脂肪酸对小鼠腹腔毛细管通透性抑 制率分别达41．39％和16．52％，均表现出一定的抗炎活性，海带多酚组未检测 出抗炎活性，且海带多糖、多酚以及不饱和脂肪酸对小鼠肝脏中丙二醛(MDA) 的产生均具有微弱的抑制能力，抑制率在10％以内。 综上所述，海带中的主要成分多糖、多酚以及不饱和脂肪酸均不同程度得 具有一定的抗氧化、降血脂以及抗炎功效，该课题从不同角度解释了海带多途 径发挥抗动脉粥样硬化作用的机制，为海带医药价值的进一步研究以及抗动脉 粥样硬化天然药物的开发提供了科学参考。 关键词：海带；提取；分离；动脉粥样硬化；作用机制 lI 万方数据 青岛科技大学研究生学位论文STUDY 青岛科技大学研究生学位论文 STUDY ON 1■匝M匣CHANISM OF 1■匝 D江IⅡ，ITI．Ⅵ乃气YS EFFECT OF LANⅡNARIA JAPONICA ON ATHERoSELEROSIS ABSTRACT