海洋养殖水体抗药性细菌种类及其抗药性基因携带情况的研究-遗传学专业论文.docxVIP

海洋养殖水体抗药性细菌种类及其抗药性基因携带情况的研究海洋养殖水体抗药性细菌种类及其抗药性基因携带情况 海洋养殖水体抗药性细菌种类及其抗药性基因携带情况的研究 海洋养殖水体抗药性细菌种类及其抗药性基因携带情况 的研究 捅要 水产养殖过程中抗生素药物的高剂量及多种药物混合使用等滥用现象，往往 伎水产病原菌在高的选择压力下产生更强的耐药性，多重药物抗性细菌也时有发 生，大大增加了微生物病害防治的难度，给水产养殖业带来严重危害。为探讨抗 性细菌的抗药性分子遗传机理，从而为控制抗药性细菌的产生和传播提供研究基 础，本研究以由大连刺参、中球海胆、皱纹盘鲍与大菱鲆这四种水体所分离的多 抗性细菌筛选为基础，利用分子生物学方法对这些抗性细菌进行了土霉素、氯霉 素及氟氯霉素抗性基因的筛选。通过对分离自这四个养殖水体中的抗性细菌16S rRNA基因序列分析和系统进化树的构建，这些抗性细菌大部分属于海洋弧菌 (Vibrio)，少数几株为假交替单胞菌(Pseudoalteromonas)或交替单胞菌 似lteromonas)。弧菌类菌株中大部分为塔斯马尼亚弧菌(Vibrio tasmaniensis)或灿 烂弧菌(Vibrio splendidus)。我们采用多重PCR方法分析这些抗性细菌中四环素抗 性基因(tet基因)、氧霉素抗性基因(删基因)与氟氯霉素(加基因)的分布特征。在 对80株抗性细菌胞r基因的分析中，共有tet(A)、tet(B)、tet(D)、tet(E)、tet(M)五种 基因单倍型被检测到，其r扣tet(B)、tet(D)、tet(M)Z种基因的携带率最高，分别 为33．8％、42．5％、41．3％。对80株抗性细菌cat-与flo基因的分析中，共有cat II与cat Ⅳ两种cat基因基因单倍型被检测到，它们的检出率分别为37．5％、18．8％；共36 株菌株携带floR基因，检出率为45．O％。研究发现，大部分耐药细菌都携带多种 抗性基因，证明它们的耐药性主要是由相应抗性基因决定的。 关键词：多抗性；海水养殖；土霉素抗性基因；tet基因；氯霉素抗性基因；cat 基因；氟氯霉素抗性基因；加JR基因 海洋养殖水体抗药性细菌种类及其抗药性基因携带情况的研究Study 海洋养殖水体抗药性细菌种类及其抗药性基因携带情况的研究 Study on antibiotic resistant bacteria in mariculturing water and their resistant genes Abstract Since many misuses 0．g the intensive and multi—drug use of antibiotics) occurred，more mutations have been selected in bacterial pathogens of mariculturing water under a hi曲antibiotic pressure，leading to a seriously antibiotic resistance．At the same time，more multi-drug resistant bacteria have appeared as a result．This phenomenon has caused even higher level of difficulty and failure in aquacultural disease control and treatment．Based on the isolation of multiple resistant bacteria from sea cucumberj sea urchin，abalone and turbot mariculturing water in Dalian, tetracycline resistant genes and chloramphenicol resistant genes as well as florfenicol resistant genes were detected using molecular methods in this study．Based on 1 6S rRNA gene sequences analysis and construction of phylogenetic tree，these multidrug．resistant bacteria were assinged mostly to genus Vibrio，and a few of them to Pseudoalteromonas and Alteromo