广西肝癌高发区乙型肝炎病毒基因型、BCP前C区突变与肝癌的相关性研究-流行病与卫生统计学专业论文.docxVIP

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2019-04-05 发布于上海
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广西肝癌高发区乙型肝炎病毒基因型、BCP前C区突变与肝癌的相关性研究-流行病与卫生统计学专业论文.docx

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2015届硕士毕业论文广西肝癌高发区乙型肝炎病毒基因型、BCP/前C区突变与肝癌的相关性研究个人简历基本情况姓名：郑丹性别：女民族：壮族出生年月：1988-10 籍贯：广西来宾政治面貌：中共党员学习工作经历起止时间 2007.9-2012.6 所在院校或单位广西医科大学学历学位本科/学士职称无 2012.9-2015.6 广西医科大学研究生/硕士无研究生期间科研经历项目起止时间项目名称项目来源本人承担任务 2013.1-2016.12 HBV基因型和准种优势株对筛选广西肝癌高发区高危人群的作用及其致癌机制的研究国家自然科学基金实验部分及数据分析 2013.1 -2016.12 乙型肝炎病毒基因型和准种在广西肝癌高发区肝癌发生、发展的作用研究广西高校科学技术研究重点项目实验部分及论文撰写目录摘要 1 ABSTRACT 3 前言 6 1 对象与方法 10 1.1研究对象10 1.2实验仪器及试剂10 1.2.1 主要仪器 10 1.2.2 主要试剂 11 1.3实验方法11 血清抗原标志物HBsAg、HBeAg检测 11 血清HBV DNA复制水平的检测 12 HBV DNA的提取 13 PCR扩增 15 1.3.5琼脂糖凝胶电泳 16 1.3.6测序 17 1 1.4 1.4 HBV 基因型的确定和突变点分析17 1.5统计学方法18 2 结果 19 2.1 研究对象基本情况19 HBV基因型 19 2.2.1 HBV基因型总体分布 19 2.2.2 HBV基因型在两组中的分布 21 HBV BCP/前C区突变 21 HBV BCP/前C区测序结果 21 HBV BCP/前C区突变情况 24 2.3.3 HBV突变在不同基因型、复制水平、HBeAg状态中的分布 24 2.3.4不同基因型、复制水平、HBeAg状态中两组患者HBV突变的比较 .25 2.4多因素分析27 2.5联合突变分析29 3 讨论 30 4 研究总结 36 附录 42 英文缩略词对照42 2 文献文献综述 43 致谢 53 攻读学位期间发表的学术论文 54 3 2015届硕 2015届硕士毕业论文广西肝癌高发区乙型肝炎病毒基因型、BCP/前C区突变与肝癌的相关性研究广西肝癌高发区乙型肝炎病毒基因型、BCP/前C 区突变与肝癌的相关性研究摘要目的研究广西扶绥县肝癌高发区乙型肝炎病毒基因型、BCP/前C区突变与肝癌发生的关系。方法用病例对照研究的方法，收集广西肝癌高发区53例HBV相关肝癌患者及70 例HBV慢性携带者的血清，提取HBV DNA，用巢式PCR法扩增 HBV S区、BCP/前C区，扩增产物纯化后测序，分析病毒基因型、BCP/前C区突变与肝癌发生的关系。结果 1. 本研究中研究对象均为B和C两种基因型，未发现其它基因型。B型占25.2% （31/123），C 型占74.8%（92/123），C型为广西扶绥肝癌高发区的主要流行毒株。B、C基因型在不同年龄组、HBV DNA复制水平、HBeAg状态中的分布差异均无统计学意义（P 0.05）。病例组和对照组中均以C型为主，分别占77.4%(41/53)和72.9%(51/7 0)，两组中B基因型和C基因型的分布差异无统计学意义（P 0.05）。 2. BCP/前C区突变频率较高（10%）的位点有T1753C、A1762T/G1764A、A1775G 、C1799G 、T1802C/T1803G/C1804T 、A1846T 、T1858C、G1896A、G1899A。两组比较差异有统计学意义的有A1762T/G1764A 、A1775G和T1858C 3个位点。其中，病例组的突变率高于对照组的是A1762T/G1764A、T1858C，突变率分别为94.3%vs.75.7%（P=0.006）和50.9% vs.31.4%（P=0.029）；对照组中的突变率高于病例组的是A1775G，突变率为28 .6%vs.13.2%（P=0.041），提示这三个位点的突变与肝癌的发生密切相关。 3. 多因素logistic回归分析纳入性别、年龄、基因型、HBV DNA复制水平、HBeAg状态以及A1762T/G1764A和T1858C、A1775G变异等相关因素，结果显示，性别、年龄、A1762T/G1764A双突变、 T1858C突变和A1775G突变均与肝癌的发生相关。男性（OR=2.767，95% CI为1.101～6.954，P=0.030）、年龄大于或等于50岁（OR=2.412，95% CI为1.022～5.694，P=0.045）、A1762T/G1764A突变（OR=5.459