疏水化阳离子透明质酸胶束介导的siRNA转染影响因素及细胞靶向性.PDF

学 报 １２４ ＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎａＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　２０１２，４３（２）：１２４－１２９ 疏水化阳离子透明质酸胶束介导的ｓｉＲＮＡ 转染影响因素及细胞靶向性研究 １ ２ １ １ １ 沈　雁 ，李　谦 ，范　达 ，李瑞臖 ，涂家生 １ ２ （中国药科大学 药剂学教研室；生命科学与技术学院，南京２１０００９） 摘　要　研究疏水化阳离子透明质酸胶束ＨＡＰＬ 介导基因转染的影响因素。通过测定ＨＡＰＬ 胶束与 ｓｉＲＮＡ形 ９６００ ９６００ 成复合物的粒径，分别考察透明质酸相对分子质量、ＨＡＰＬ 浓度、ＨＡＰＬ 与 ｓｉＲＮＡ比例、ｐＨ、介质、孵育时间以及血清 ９６００ ９６００ 对疏水化阳离子透明质酸胶束体外转染效率的影响，筛选较优的转染条件。同时进行受体抑制实验，考察该载体的细胞 靶向性。结果表明当透明质酸相对分子质量为９６００、载体与ｓｉＲＮＡ质量比为８，孵育时间为３０ｍｉｎ、体系中ＨＡＰＬ 浓 ９６００ 度为１５ｍｇ／ｍＬ，转染介质为ｐＨ６８的ＰＢＳ溶液时转染效率较高。游离透明质酸可抑制经ＣＤ 介导的ｓｉＲＮＡ的转染效 ４４ 率。ＨＡＰＬ 可作为合成新型靶向非病毒载体的骨架，但必须控制有关因素才能得到可重复的最佳转染结果。 ９６００ 关键词　ｓｉＲＮＡ；疏水改性；透明质酸胶束；细胞靶向；转染效率 中图分类号　Ｒ７３５７　　文献标识码　Ａ　　文章编号　１０００－５０４８（２０１２）０２－０１２４－０６ Ｉｎｆｌｕｅｎｃｉｎｇｆａｃｔｏｒｓｏｆｈｙｄｒｏｐｈｏｂｉｃｍｏｄｉｆｉｅｄｈｙａｌｕｒｏｎｉｃａｃｉｄｂａｓｅｄｃａｔｉｏｎｉｃ ｍｉｃｅｌｌｅｓａｎｄｃｅｌｌｔａｒｇｅｔｉｎｇｉｎｓｉＲＮＡｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ １ ２ １ １ １ ＳＨＥＮＹａｎ 牞ＬＩＱｉａｎ牞ＦＡＮＤａ牞ＬＩＲｕｉｊｕｎ牞ＴＵＪｉａｓｈｅｎｇ １ ２ ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ牷ＳｃｈｏｏｌｏｆＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅ＆Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ牞ＣｈｉｎａＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ牞Ｎａｎｊｉｎｇ２１０００９牞Ｃｈｉｎａ Ａｂｓｔｒａｃｔ　ＴｈｅｏｂｊｅｃｔｉｖｅｗａｓｔｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｉｎｆｌｕｅｎｃｉｎｇｆａｃｔｏｒｓｏｎｔｈｅｓｉＲＮＡｄｅｌｉｖｅｒｙｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙｏｆｈｙｄｒｏｐｈｏ ｂｉｃｍｏｄｉｆｉｅｄｈｙａｌｕｒｏｎｉｃａｃｉｄｗｉｔｈｍｏｌｅｃｕｌａｒｗｅｉｇｈｔ９６００ｇｒａｆｔｅｄｗｉｔｈｓｐｅｒｍｉｎｅａｎｄｌａｕｒｙｌａｍｉｎｅｃａｔｉｏｎｉｃｍｉｃｅｌｌｅｓ 牗ＨＡＰＬ 牘．ＴｈｅｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙｏｆＨＡＰＬ ／ｓｉＲＮＡｗａｓｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙＴｈｅｉｎｆｌｕｅｎｃｅｏｆ ９６００