毛细管反相电色谱法分离行为的研究＊.PDF

毛细管反相电色谱法分离行为的研究* 魏 伟 王义明 罗国安** 清（华大学化学系 北京 100084） 提 要 对乙腈-水-磷酸二氢钠体系毛细管反相电色谱分离行为进行了研究。采用柱上紫外检测，在75μ蘭mi. d.×30cm的毛细管ODS3（μ蘭m）填充柱上获得了小于2.0的折合塔板高度。同时还研究了乙腈的比例、电解质 的浓度和电场强度等因素对电渗流和柱效的影响。 关键词 毛细管反相电色谱法，毛细管ODS填充柱，柱效 分类号 O658 1 前言 据。 毛细管电色谱法(capillaryelectrochromatog- 2 基本原理 raphy，简称CEC)是80年代末期刚刚兴起的一种高 效微柱分离技术。虽然Pretorius(1)早在1974年就发 2.1 电渗流 表了第一篇CEC的论文，但CEC一直未受到人们 CEC采用电场推动流动相，即用含有一定电解 的重视。直到80年代末期，在Knox等 2（.3）详细研究 质浓度的极性溶液作为流动相。pH3时，毛细管内 了电色谱法的有关理论后才为CEC的发展提供了 壁的硅醇离解，通过静电作用吸附流动相中的正电 依据。他们的研究表明，电色谱法在柱效上明显地高 荷，在毛细管内壁附近形成双电层。在毛细管两端施 于HPLC。近年来有关CEC研究的报道 日见增多。 加一定电压便可产生电渗流，电渗流方向一般指向 Yamamoto等4（）报道了在1.6μ蘭mODS毛细管填充 阴极。对于填充的毛细管，其电渗流 μeo公式）为 柱上对于不保留的物质获得了大于200000／米的塔 板数。Smith等5（）报道了用电色谱法分离一些药物 中间体，采用1.8μm的ODS固定相在内径为50μ蘭m 色谱柱上对于保留的溶质获得了380000／米的理论 塔板数。Yan等6（）报道了采用激光诱导荧光检测技 术，用3.0μ蘭m的ODS固定相在501μm的毛细管柱上 式中，E,U和L分别是电场强度、分离电压、毛细管 用CEC分离了16种多环芳香化合物，获得了 总长度；,O分别为溶剂的介电常数和真空介电常 400000／米的理论塔板数。可见这一技术正逐步受 数；ζ,分别是Zeta电位和双电层厚度；为流动相 到分析化学家的重视。开展电色谱法的研究有着重 的粘度；是毛细管内壁表面电荷超量；和F是电 要的理论价值和广阔的应用前景。CEC一般采用熔 解质浓度和法拉第常数。 融的石英毛细管柱，内径在50～200m范围，柱内 从方程 1（），2（）和 3（）可知电渗流与流动相的介 填充高压液相色谱法用的固定相，以高压直流电源 电常数、粘度以及电解质的浓度等因素有关，而与柱 代替高压泵，即用电渗流代替压力推动流动相。溶质 的直径和填充微粒的大小无关，因而其线速不受柱 依其在流动相与固定相中的分配系数的不同和 自身 填充不均匀等因素的影响。 电泳淌度的差异得以分离。因而CEC既能分离中性 2.2 保留机理 物质又能分析带电物质。它弥补了毛细管电泳分离 CEC的保留机理可用下式表示，溶质的迁移 中性物质的不足，又具有HPLC所有的选择性，是 率 3（）为 一种新型分离技术。目前这一技术国内尚未见报道。 本文首次研究的这一方法在分离中各种操作因素对 电渗流及柱效的影响，将为今后的工作提供理论依 *国家自然科学基金资助项 目 **通讯联系人 本文收稿日期：1996-05-01，修回日期：1996-07-20 式中uep是分析物的电泳速度，k=流动相中组分的 电解质浓度增大时，双电层厚度减小，由式(1)~(3) 量填（充微粒外）／固定相中组分的量填（充微粒内）， 可知，Zeta电位降低，相应的电渗流减小。 即分析物的容量因子。 当分析物为中性物质时，uep=0，式 4（）变为： 此时，流动相的线速度即为电渗流的大小。由式 4（） 可知，溶质