质谱概述质谱仪定性定量方法及应用色谱联用技术简介化学电离源.ppt

* * * * * * * * * * * * * * * * * * 第十章 质谱法 湖南食品药品职业学院 于勇 目录 Contents * * * * 质谱概述 质谱仪 定性定量方法及应用 色谱联用技术简介 * 质谱概述 质谱仪 定性定量方法及应用 色谱联用技术简介 * 质谱概述 质谱仪 定性定量方法及应用 色谱联用技术简介 * 质谱概述 质谱仪 定性定量方法及应用 色谱联用技术简介 谢谢观赏 THANK YOU FOR YOUR GUIDANCE. 第二节 质谱仪 基本结构 质谱仪一般由进样系统、离子化系统（离子源）、质量分析器、检测系统、真空系统和自动控制及数据处理系统构成。 真空泵 基本结构 进样系统 间歇式进样 （适用：气体和低沸点易挥发液体） 直接探针进样 （适用：高沸点液体及固体） 基本结构 进样系统 质谱仪通常会与气相色谱、液相色谱等仪器联用，用于分离和检测复杂化合物的各种组分。将色谱分离后的流出组分通过适当的接口引入质谱系统，称之为色谱进样。 毛细管柱 电子轰击源（electron impact source，EI） 离子源 基本结构 70 eV 化学电离源（chemical ionization source，CI） 离子源 基本结构 离子源 基本结构 EI：离子化效率高，是标准质谱图首选电离源；但轰击能量大，对分子量大或极性大、难气化、热稳定性差的有机物易产生大量碎片离子，质谱解析困难 CI：质谱图简单，电离样品分子是能量较低的二次离子，产生碎片离子峰的数目减少；准分子离子峰强度大，可提供样品分子量信息。 场电离源（field ionization source，FI）：分子需气化后电离，不适用于难挥发、热不稳定的有机化合物； 场解吸电离源（field desorption ionization source，FD）：分子无需气化再电离，特别适用于非挥发性、热不稳定的生物样品或相对分子质量高达十万的高分子物质，常常只看到（准）分子离子峰。 离子源 基本结构 离子源 基本结构 基质辅助激光解吸离子源（matrix-assisted laser desorption ionization source，MALDI） 特别适合与飞行时间质量分析器配套使用，应用于分析生物大分子，如肽、蛋白质、核酸等，可以得到精确的分子量信息。 电喷雾电离源（electrospray ionization source，ESI） 离子源 基本结构 不易发生裂解，特别适合于热不稳定的生物大分子，获得分子量信息; 可在大气压条件下，使溶液中样品分子离子化，适合于高效液相色谱联用。 大气压化学电离源（Atmospheric pressure chemical ionization source，APCI） 离子源 基本结构 离子化效率高，适用于非极性或中等极性的小分子分析； 电离在大气压条件下进行，适合于高效液相色谱联用。 磁质分析器（magnetic analyzer） 质量分析器 基本结构 单聚焦分析器分辨率较低，测量范围m/z小于5 000； 双聚焦分析器分辨率高，测量范围m/z达150 000。 四极杆质量分析器（quadrupole mass analyzer） 质量分析器 基本结构 分辨率较高，测量范围m/z达2000，灵敏度高； 分析速度快，适合与色谱仪。三重四级杆质量分析器，有更好的专属性、选择性和灵敏度。 飞行时间质量分析器（time of flight analyzer，TOF） 质量分析器 基本结构 质量检测范围没有上限，适用于生物质谱仪（如分析蛋白质）； 扫描速度快，体积小，操作方便； 重现性差和分辨率低。 离子阱质量分析器（ion trap analyzer） 质量分析器 基本结构 获得多级质谱 检测系统 基本结构 常见的类型有电子倍增管 、闪烁检测器、法拉第杯； 将离子流信息转换为可以记录的信号。 真空系统 基本结构 离子源真空度应达1.3×10-5 Pa，质量分析器应达1.3×10-6 Pa； 机械泵将系统的真空度预抽到10-1～10-2 Pa，再经油扩散泵或涡轮分子泵继续抽吸并维持所需的真空度。 质量范围：指质谱仪能够测量离子的质荷比范围（amu or Da） 分辨率：分辨率表示质谱分开两个相邻的质量差异很小的峰的能力（R）。小于1000的为低分辨质谱仪，如单聚焦磁质谱仪、四级杆质谱仪、离子阱质谱仪和飞行时间质谱仪等；R值大于1000的为高分辨质谱仪，如双聚焦磁质谱仪。 灵敏度：包括检出下限和分析灵敏度。检出下限是指质谱仪可以检测到的最小样品量。分析灵敏度是指质谱仪的输入样品量与输出信号之比（S/N）。 准确度：指离子质量实测值与理论值的接近程度，通常用相对误差表示。 精密度：指