光温敏不育水稻不育临界温度的遗传及分子机理研究-作物遗传育种专业论文.docxVIP

中文摘要／水稻的杂种优势利用是粮食增产的主要途径，而两系法杂交稻技术的应用是 中文摘要 ／水稻的杂种优势利用是粮食增产的主要途径，而两系法杂交稻技术的应用是 水榴高产育种的重要途径，主要原因在于：两系杂交稻的亲本间不存在恢保关系， 因此配组自由，优势易于协调。特别是在三高农业中，利用亚种间的杂种优势， 选育优质高抗配合力好的亲本是杂交水稻育种工作的关键。采用两系法将会省去 三系法所必需的大量繁琐的步骤，从而大大缩短育种周期，提高育种成效。近年 来两系杂交稻优势组合选育已取得较大进展即是对这一点的良好说明。 但是，光温敏不育系的不育临界温度问题却深刻地影响着两系杂交稻的发展。 不育临界温度也称不育起点温度、临界温度、起点温度，即在生物学下限温度之 上，当温度降低至长日开始不能实现不育诱导时的温度。优良实用型的光温敏不 育系必需具有较低的不育临界温度，这是两系法杂交稻发展的前提。因为不育l临 界温度较高的不育系只有在较高温度下才表现不育的特性，当其在长日条件下进 行制种时，若遇上低温天气则会发生育性恢复而自交结实，从而使制种的纯度降 低。目前生产上的一个突出问题是：原来鉴定为低临界温度的不育系经过几代的 繁殖后，临界温度会逐代升高，从而使该不育系逐渐丧失实用性能。这一问题在 光、温敏不育系中具有普遍性，是两系杂交稻发展过程中最棘手的问题。y 本研究以临界温度性鉴为研究对象，以目前广泛应用的光温敏不育系N5088S 及其仅存在临界温度差异的变种H5088S为基本亲本，配制包括正反交、回交等在 内的七世代群体，通过劈蘖后将各世代中的每个单株一分为四而形成基因型结构 相同的四套材料，于温度敏感期进行四种温度的处理。抽提了F2、亲本及其株系叶 片中的DNA，提取了亲本不同处理时期的幼穗中的RNA。开展的研究内容有：光 温敏不育系不育临界温度的遗传；不育临界温度的AFLP标记筛选；连锁的AFLP 标记的克隆测序及分析：在生丝焦璺堂分析的基础上，以△呈LP连主}li抵主己为出发枣， 以两亲本的全长cDNA池为检测对象，对两亲本间的藿羞盎达进行了初步研究。悻 、 、 要结果如下。 1．砌9验及f测验显示，四种温度条件下的Fl’与Fl育性差异不显著，说明双 亲的细胞质差异对育性差异的影响并不明显，即细胞质效应不明显，引起双亲不 育临界温度差异的基因存在于细胞核中。 2． F2的单株育性总体趋势是随着温度的升高而逐渐降低，但是在25．5。c、 27．5。C两种处理条件下存在少数例外的单株。它们的育性在这两种温度下升至最 高，而在23．5。c,n30。C条件下的育性反而偏低。暗示：分离群体中类似的例外单株 的存在可能是导致来自不同光温敏不育系的研究群体的结果发生差异的原因。 3．1ECM算法结果显示：在23．5 6C条件下，有两对主基因、微效基因及二者各 自的上位性效应控制着临界温度的遗传。Il缶界温度的广义遗传力为80％．97％．低临 界温度对高临界温度为显性。 4．206对AFLP弓[物组合的筛选结莱显示：在所检测的约14777个位点上， 4．206对AFLP弓[物组合的筛选结莱显示：在所检测的约14777个位点上， N5088S与H5088S间仅有0．35％的多态往，表明二者闻的差异相警微小，可以作为 近等基因系对待。 5．黻勐细p舻mv检验为手段，在经典遗传学静萋磷上、结合大量事例榷定： 与转座戳子稻类似的梳涮哥能是稿器温度性状不稳定幸生豹原因。 6。／vlapMaker俸胬软件分柝表弱：所褥到静23令AFLP标记可以转成4令遘铰群； 涟君静QTL分拆表暖：仪在第三群静标记P18与P34闼存在一主效QTL。荚LOD馕 蔑达12．16，覆繇解释靛表型变爨必52．95螗一55．14％． 7。罄收克隆了标避P34，测痔分辑显示：该片段来源予TrulI单游切戆结果。 深入分攒表盟：该片段落在来叁Nippon蚰fe蟾第7染怨传上的大片段AP004308@， 二考闻驰圃源性裹达99％。撰此将P34对应的控铡蟾暴瀑度性状的基因定位在第7 染色体妖譬近末端，共念名为CSPt。 8．基于P34对应的区段在表型中的极赢的遗传贡献攀这～事实，对P34所在的 大片段进行了序列分析，结果显示：有四类基因可能与临界温度的不稳定性表达 相关，它们是：蔗糖合成酶基因，转座酶编码基因：富含亮氨酸拉链的跨膜蛋白 基因；转录因子编码基因。 9．以P34的5’区段上的特异引物与cDNA合成时所用引物构成的引物组合，在全 长c蹦A、掩中进行扩增，发现p34在两亲本闻也存在表达差异。卜’＼／ i 2 ABSTRACTRice ABSTRACT Rice is a staple food for most of the population in the world．Increase