海带与羊栖菜的生物活性和化学成分研究-生物学专业论文.docxVIP

温州医科大学硕士学位论文目录 温州医科大学硕士学位论文 目录 摘要 1 Abstract ．：； l海带的抗氧化活性研究 6 1．1材料与方法 ．7 1．2海带粗提物的抗氧化活性筛选结果 10 1．3讨论 ．12 2海带的化学成分的分离与结构鉴定 ．15 2．1材料与方法 ．．15 2．2化合物结构分析与鉴定 17 3羊栖菜的降血糖活性研究 ．21 3．1材料与方法 一22 3．2羊栖菜的粗提物的降血糖活性筛选结果 26 4羊栖菜的化学成分的分离与结构鉴定 ．29 4．1材料与方法 一29 4．2化合物结构分析与鉴定 30 5结予爸 34 5．1总结 34 5．2后续工作建议 一34 附录1 ．38 附录2 39 致谢 ．45 综述 ．46 学位论文独创性声明 58 万方数据 温州医科大学硕士学位论文海带与羊栖菜的生物活性和化学成分研究 温州医科大学硕士学位论文 海带与羊栖菜的生物活性和化学成分研究 摘要 本文对海带和羊栖菜的生物活性及化学成分进行研究，丰富了两者的化学成 分多样性，为这两种海藻的进一步利用提供基础。 海带与羊栖菜均属于褐藻门海藻，营养价值很高，人们大多将它们作为经济 海藻来利用。经过多年来养殖技术的研究，海带与羊栖菜的养殖规模日益增大， 产量递增。但是目前的研究中很少涉及对海带与羊栖菜的深度利用，关于两者的 生物活性与化学成分研究需要跟上其养殖栽培的步伐。 初步的研究表明，大多数经济海藻具有较强的调节血脂、降血糖、降血压、 抗凝血、抗肿瘤、抗突变和防辐射、抗氧化、抗病毒、增强免疫功能，含有多种 天然生物活性成分，本研究通过对海带的体外抗氧化、羊栖菜的体外降血糖活性 以及化学成分进行研究，为两者的进一步应用提供基础资料，以期将研究成果应 用到天然抗氧化剂和降血糖药的开发上，从而创造更多的经济与社会价值，利于 人类健康和生活水平的提高。本文分四个部分对海带与羊栖菜的生物活性与化学 成分进行了比较系统的研究，内容如下： 一、运用化学方法对海带粗提物的体外抗氧化活性进行评价，涉及对二苯代 苦味酰基苯肼自由基(DPPH·)、羟基自由基(·OH)的清除活性以及还原力大 小三个方面，结果如下：海带不同溶剂萃取物均有不同程度的的抗氧化活性且海 带萃取物的还原力及对DPPH自由基、羟基自由基的清除活性均成量依赖性关 系，粗提物物的浓度越高，清除率越高，还原力越好；其中海带乙酸乙酯萃取物 的抗氧化能力最强，在质量浓度为1．0 mg／mL时，对DPPH自由基、羟基自由基 的清除率分别达到62．97％、88．23％。海带乙酸乙酯萃取物还原力也最强，其FRAP 值达到508．55 pmol／L，高于对照抗坏血酸(FRAP值为267．5 gmol／L)。使用单 一方法不能全面反映海带粗提物的抗氧化活性，本文从多个方面评估了海带粗提 物的抗氧化生物活性，从以上结果可以看出，海带乙酸乙酯萃取物在清除活性氧 自由基、还原力方面均表现出了比较显著的优势，其抗氧化生物活性较好，具有 开发为天然抗氧化剂的价值。 二、采用反复硅胶柱色谱、Sephadex LH一20凝胶柱色谱、制备薄层层析等手 段，对海带甲醇提取物的石油醚萃取物进行分离纯化，获得5个化合物，利用理 化性质和波谱学方法，分别鉴定为：邻苯二甲酸丁基酯2．乙基己基酯(W1)， 万方数据 温州医科大学硕士学位论文邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(W2)，顺．5，8，11，14．二十碳四烯酸(W3)， 温州医科大学硕士学位论文 邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(W2)，顺．5，8，11，14．二十碳四烯酸(W3)， 24-亚甲基胆甾醇(W4)，褐藻素A(脱镁叶绿素A(W5)，5个化合物均为首 次从海带中分离得到。 三、通过建立体#t,ct．葡萄糖苷酶抑制筛选模型对羊栖菜提取物进行降血糖活 性筛选。该模型是从天然产物中筛选a．葡萄糖苷酶抑制剂活性物质最早建立、最 常用、最经典的筛选模型。该筛选模型特别适用于初步筛选。运用此筛选模型对 羊栖菜提取物进行降血糖活性筛选。筛选结果表明：羊栖菜不同溶剂粗提物均具 有旺-葡萄糖苷酶抑制活性，且抑制活性与质量浓度呈正向相关关系。但各萃取物 Ⅱ-葡萄糖苷酶抑制活性均低于对照阿卡波糖(IC50=0．60 g／L)。羊栖菜的石油醚 萃取物及60％乙醇沉淀粗多糖对cc一葡萄糖苷酶抑制活性较强。石油醚萃取物的a． 葡萄糖苷酶抑制活性最好(IC50=4．35 g／L)，60％乙醇沉淀粗多糖的c【．葡萄糖苷 酶抑制活性紧随其后(IC50=4．57 g／L)，这二者具有开发成为治疗糖尿病降血糖 药的潜力。 四、与第二部分的分离纯化方法基本一致，对羊栖菜乙醇提取物的石油醚萃 取物进行分离纯化，获得4个化合物，利用理化性质和波谱学方法，分别鉴定为： 邻苯二甲酸二正丁酯(Z1)、岩藻