乙烯利调控甘蔗基因差异表达研究.pdfVIP

南方农业学报201l，42(1)：6-lO of JournalSoutllem Agrielllture 乙烯利调控甘蔗基因差异表达研究 魏源文，邓智年，黄诚梅，李杨瑞’ (广西作物遗传改良生物技术重点开放实验室，南宁530007) 摘要：【目的】建立并优化乙烯利调控甘蔗基因差异表达的cDNA-An盼析体系和银染体系，利用该技术对乙烯 利处理的甘蔗进行基因差异表达研究．探讨乙烯利调控甘蔗生长的分子机理。【方法】以甘蔗品种ROCl6为材料，在甘 蔗生长加d左右时，叶面喷施200 612、24、48h后，分别取甘蔗叶片提取总RNA，建 mgnZ烯利溶液(对照为清水)o…3 立eDNA—AnP分析体系和银染体系；利用193对引物组合对乙烯利处理和对照的甘蔗叶片RNA混合池的样品进行差 异表达分析，对部分差异转录片段进行回收、克隆、反向No．hem杂交验证、序列分析和功能分析等。【结果】经eDNA— AFu体系反应扩增，乙烯利处理和对照每个样品的扩增条带数均在35—80之间，处理和对照之间条带多态性明显。在 ARP、LHC、核结合蛋白基因以及一批未知基因差异表达，其中CHI、GST、脚核结合蛋白基因是与促进植物的抗病 抗逆、提高光合作用等密切相关的因子。【结论】eDNA—An臌术是研究乙烯利诱导甘蔗相关基因差异表达和调控的 一种较有效方法，具有可行性。乙烯利可能是通过调控甘蔗体内GST,CHI、A冗册上J托等基因的表达，从而表现出促进 甘蔗生长、提高光合作用、增强抗病抗逆性等生理效应。 关键词：甘蔗；乙烯利；eDNA—AFLP；基因差异表达 中图分类号：$566．1 文献标识码：A differential in Ethephonregulated geneexpressionsugarcane WEI Yuan-wen，DENGZhi-nian，HUANG Cheng-mei，LIYang-rui’ Genetic and (Guan铲i Bioteehnologym，Nanning530007，China) Crop Improvement to the cDNA-AFLPand8I! experiment哪conducted Abstract：【Objective]Thepresent developoptimized protocol the efficientsilver to thedifferential of tounderstand stainingsystemstudy expressionsgenesregulatedbyethephon，and mechanismof and of molecular in ethephonregulatedgrowthdevelopmentsugarcane．【Meth