肾活检病理制片常见问题.pptVIP

病理制片常见问题及对策 北京 解放军总医院肾科 师锁柱 光镜、免疫荧光、电镜观察肾活检组织结构对诊断各种类型的肾小球疾病有重要意义 标本处理及制片质量的好坏，与诊断的难易及准确与否有着极为密切的关系 必须重视标本制备中的每个细小环节 常见问题 解决办法 组织固定不及时、自溶 固定液配制不当 组织浸蜡温度过高 展片水温过高 组织脱水时间不足 组织切片厚≥4um 切片有刀痕、薄厚不匀 室温过高 切片有皱纹 常见问题 解决办法 脱 片 常见问题 解决办法 入Schiff氏染液时间过长 常见问题 解决办法 Schiff氏染液失效 或染色时间不足 常见问题 解决办法 六胺银染液配制不当、失效 切片入六胺银染液时间不足 氯化金分化过度 常见问题 解决办法 Masson液 染色时间过长 Masson染色 苯胺兰液染色 时间过长 常见问题 解决办法 组织自溶或冻融 附贴时手晃动，载玻 片完全附贴于刀上 冰冻切片、免疫荧光染色 厚度≥5um 　　 小 结 * * * * * * * 肾活检组织 前 言 肾活检标本的制片程序 取材 分 割 免疫荧光 光镜 固 定 脱 水 浸 蜡 光镜观察、报告 透 明 包 埋 石蜡切片 染 色（HE、PAS、PAM、Masson 染色） 烤 片 封 片 电 镜 固 定 超薄切片 ······ 电子显微镜观察、报告 液氮冷冻 OCT包埋 冰冻切片 染 色 (IgG、A、M、C3、C4、C1q、Fib) 荧光显微镜观察、报告 解放军总医院肾科 免疫荧光 电 镜 常用染色 HE PAS Masson PAM-Masson 刚果红 油红“O” 光 镜 IgA IgG 解放军总医院肾科 组 织 固 定 新鲜立即固定 重新严格配液 HE HE HE 解放军总医院肾科 常见问题 解决办法 根据石蜡熔点选择蜡熔 点之间的浸蜡温度（57 ℃ ） 35 ℃左右 组 织 浸 蜡 PAS PAS 解放军总医院肾科 适当延长时间， 摇床上进行 常见问题 解决办法 组 织 脱 水 PAS PAS PAM PAS 解放军总医院肾科 组织脱水时间过长 适当缩短时间 常见问题 解决办法 组 织 脱 水 PAS PAM PAM 解放军总医院肾科 切片厚度≤2um 常见问题 解决办法 组 织 切 片 PAS PAS PAM 解放军总医院肾科 选用优质石蜡、刀刃锋利， 收紧刀架螺旋， 安装空调 切片时：快、准、稳、匀 常见问题 解决办法 组 织 切 片 HE Masson Masson HE 解放军总医院肾科 ① 载玻片洗涤不洁， 有油脂 ② 捞片时，切片未摊平 ③ 烤片时间不足， 温度不够，急于染色 ④ 染色过程中， 水洗速度过快 ① 新鲜配制泡酸液， 保证泡酸时间 ② 将组织切片周围水份吸干 ③ 适当延长时间，升温 ④ 缓缓漂洗 ⑤ 涂PLL（防脱片剂） 解放军总医院肾科 常见问题 解决办法 HE染色 伊红染色时间不足 适当延长伊红染色时间 解放军总医院肾科 PAS染色 根据切片薄厚， 肉眼观察 掌握时间（至切片变淡粉 红色、立即入水。） 解放军总医院肾科 配制新鲜染液，适当延长 染色时间，肉眼观察至切片 变淡粉红色、立即入水。 PAS染色 解放军总医院肾科 PAM染色 染液现用现配 适当延长孵育时间（镜检） 选用低浓度氯化金分化 解放军总医院肾科 银染过度 常见问题