专题2细胞工程知识总结.docVIP

专题2细胞工程 (一)植物细胞工程 理论基础(原理)：细胞全能性 全能性表达的难易程度：受精卵〉生殖细胞〉干细胞〉体细胞;植物细胞〉动物细胞 植物组织培养技术 过程：离体的植物器官、组织或细胞一-＞愈伤组织一-＞试管苗一-直物体 用途：微型繁殖、作物脱毒、制造人工种子、单倍体育种、细胞产物的工厂化生产 地位：是培育转基因植物、植物体细胞杂交培育楨物新品种的最后一道工序。 植物体细胞杂交技术： (1)过程： 勸细腳H原生质脚 去壁 翻细胞乙上-‘原生祕乙 氣新的原生 植物细孢A ① 再生 细腿 ■卜杂种醐 脱靴 愈伤组织 再分化 杂种植株 原生质体A 植物细抱B i生质体B 原理:细胞膜的流动性、细胞的全能性. 诱导融合的方法：物理法包括离心、振动、电刺激: 化学法一般是用聚乙二醇(PEG)作为诱导剂。 意义：克服了远缘杂交不亲和的障碍。 (二)动物细胞工程 1.动物细胞培养 (1)概念：动物细胞培养就是从动物机体屮取出相关的组织 将它分散成单个细胞,然后放在适宜的培养基中, 让这些细胞生长和繁殖。 杂种细絶 (2)动物细胞培养的流程: 杂种植株 剪碎 幼龄动物醐或鵬单个鵬 细胞悬液^^＞细胞贴壁生长 胰蛋白酶 传代培养 ?细胞悬液竹?细胞株或细胞系 细胞贴壁和接触抑制：娃液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称力细胞贴壁。细胞 数0不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时,细胞就会停止分裂增殖，这种现象 称为细胞的接触抑制。 动物细胞培养需要满足以下条件 ①无菌、无毒的环境:培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素 以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积 累对细胞自身造成危害。 ②营养：合成培养基成分.?糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微:W:元素等。通常需加入血 清、血浆等天然成分。 温度:适宜温度：哺乳动物多是36. 5°C+0. 5C: pH： 7. 2?7.4。 气体环境:95%空气+ 5%C02。0。是细胞代谢所必耑的，C0：的主要作川是维持培养液的pH。 （5）动物细胞培养技术的应用：①生产生物制品：疫苗、干扰素、单克隆抗体等；②作为 基因工程中的受体细胞；③检测有毒物质及毒性大小；④科研方面：筛选抗癌药物、治疗 和预防疾病等。 （6）动物细胞培养与植物组织培养的区别 — 植物组织培养 动物细胞培养 理论基础（原理） 细胞的全能性 细胞增殖 培养基的物理性质 固体 液体（合成培养基） 培养基的成分 水、矿质元素、蔗糖、 氨基酸、琼脂等 葡萄糖、氨基酸、无机盐、 维生素、动物血清等 过 程 外植体（离体根、茎、叶等） （半） 固体培养基 愈伤组织——-胚状体 再|培养基 |人工胚乳 分1光照 1 和种皮 试管幼苗 人工种子 翻， 1 植株- 1 动物胚胎或幼龄 动物的组织器宮 剪碎1胰蛋白酶处理 单个细胞 1埼葬液 细胞悬浮液 坊养瓶中丨筇龆 细胞株 1传代培养 |（11~40 或 50 代） 细胞系 （遗传物质发生改变） 结果 新的植株或纟 11织 新的细胞株或细胞系 用途 植株快速繁殖②脱毒植株的培育 人工种子④生产药物、杀虫剂等 ⑤转基因植物的培育 牛《产蛋白质制品如病毒疫 苗、干扰素、单克隆抗体等： 检测有毒物质；③研宂药理 病理；④移植治疗 相同点 都需人工条件下的无飽操作，需要适宜的温度、PH、02等 特别注意以下几点： 1）.动物细胞培养基成分特有的动物血清含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等多种成 2）.两技术手段培养过程屮都进行有丝分裂，都是无性繁殖，都可称克隆，都不涉及减 数分裂。 3）.植物组织培养最终产生新个体，体现全能性；动物细胞培养产生大量细胞，不形成 新个体，故不能体现全能性。 动物体细胞核移植技术和克隆动物 （1）哺乳动物核移植可以分为歷胎细胞核移植（比较容易）和体细胞核移植（比较难）。 （2）选用去核卵（母）细胞的原因：卵（母）细胞比较大，容易操作;卵（母）细胞含有激活细 胞核全能性的物质和营养条件。 (3)体细胞核移植的大致过程是：(如图) 体细胞核移植技术的应用： 加速家畜遗传改良进程，促进良畜群繁育；②保护濒危物种，増大存活数量； ③作为生物反应器生产珍贵的医用蛋白； ④转基因克隆动物作为异种移植的供体; ⑤人核移植胚胎干细胞诱导分化后提供组织、器官用于移植等。 体细胞核移植技术存在的问题： 克隆动物的成功率很低. 兑隆动物存在着毽邃问题、表现出遗传和生理缺陷. 克隆动物食品的安全性问题等。 动物细胞融合 动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。融 合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。 动物细胞融合与植物原生质体融合的原理基本相同，诱导动物细胞融合的方法与植物 原生质体融合的方