IVM对鲫鱼影响研究.docxVIP

　　本文作者彭章晓1,2江敏1吴昊1何琳1杨李1作者单位1上海海洋大学水产与生命学院2上海交通大学药学院伊维菌素，为阿维菌素的衍生物，是由链霉菌产生的一种大环内酯类物质，具有用量小、效果好、安全性高等特点，在农牧业中常作为抗寄生虫剂和杀蜻剂使用。 　　随着水产养殖规模和密度的不断扩大，一些寄生虫病如鲺病、车轮虫病、指环虫病和异尖线虫病等给水产养殖业造成的损失与日剧增，甚至可能危害人类健康［1］。 　　作为一种新型、高效的鱼类抗寄生虫药剂伊维菌素在国外水产养殖中已有一定范围的使用。 　　欧洲许多国家如苏格兰、爱尔兰等将其添加到饲料中，用于鲑鱼和海鲷养殖中的海虱防治［2－3］。 　　我国主要将其应用于淡水鱼养殖中的斜管虫、车轮虫病防治［4－5］。 　　目前，有几篇文献报道了对哺乳动物的毒性作用，如等［6］实验表明不具遗传毒性和潜在致癌性;等［7］实验结果显示，当与－糖蛋白抑制剂联合使用时，会影响雄鼠的生殖系统;等［8］研究发现，还会一定程度上影响动物的免疫力。 　　现在作为渔药使用范围越来越广泛，因此除了要关注它的环境毒性外，研究它对养殖鱼自身的毒性作用也是很有必要的，硬骨鱼类的血脑屏障发育不完善，因此较易到达鱼的头部，但目前关于在鱼体内的毒理学方面研究甚少。 　　鱼类的血液指标与许多因素有关，如机体的年龄、营养代谢状况、健康状况等。 　　当鱼体受到外界因子的影响而发生生理或病理变化时，必定会在血液指标中反映出来，因此血液指标常被用来评价鱼类的营养、健康状况及对环境的适应性，是重要的生理、病理和毒理学指标［9］。 　　本实验以不同给药剂量研究了对鲫血液成分的影响，以期评价对鲫的毒性效应，为的科学使用和管理提供一定的依据。 　　1材料与方法11实验动物鲫购自上海果园集贸市场，健康无伤病，平均体重250±20。 　　实验前在循环水养殖箱250×150×70中暂养30，水温控制在25±1℃，增氧机充氧，投喂全价鱼饲料浙江恒兴饲料有限公司，暂养期间死亡率低于5。 　　12仪器与试剂实验所用仪器纯水机－、电子天平2004、超低温冰箱－700、全血分析仪－2800和生化分析仪－200等。 　　所用药品标准品公司、无水乙醇和肝素钠均为分析纯国药公司、－超纯水、总蛋白测定试剂盒双缩脲法、白蛋白测定试剂盒溴甲酚绿法、总胆红素测定试剂盒－重氮法、丙氨酸氨基转移酶测定试剂盒紫外－乳酸脱氢酶法、碱性磷酸酶测定试剂盒缓冲液法和钙测定试剂盒－邻甲酚酞络合酮终点法，上述试剂盒均购自迈瑞生物医疗电子股份有限公司。 　　13给药与采样将实验用鲫随机分成、、、、五组，每组27尾。 　　、、三组口灌给药，给药剂量分别为30、10、04，以无水乙醇为溶剂;组口灌与前三组等体积的无水乙醇作对照，每条鲫鱼灌入的无水乙醇的量小于03;组不做任何处理。 　　给药前6禁食，给药后6投饵。 　　分别在给药后1、2、4、8、16、24、48、96、192取样，每个时间点每组均取3尾鱼，抽取鲫血液后分成两份，置于含少量1肝素钠已风干离心管中。 　　一份立即进行全血分析，另一份经离心5后分离血浆离心力2000，于－80℃保存用于血液的生化分析。 　　14血样分析鲫经静脉采血后立即进全血分析仪进行分析。 　　用于生化组分分析的血浆从－80℃冰箱中取出后，在0℃的条件下解冻，将解冻后的血浆摇匀后进生化分析仪分析。 　　2结果21对鲫血细胞的影响口灌对鲫血液中红细胞、白细胞、血小板、红细胞压积、血红蛋白等指标的影响结果见表1。 　　组间单因素方差分析可知，实验组鲫、、、与对照组间均无显著性差异，而则与对照组存在组间显著性差异=0043＜005。 　　双样本等方差－检验显示组和组间无显著性差异，组和、、组间均存在显著性差异值分别为002、0016和0007，均小于005，表明口灌对鲫数量有显著影响。 　　图1显示，不同采样时间，给药组鲫的数量波动较大给药后8～16数量快速增加，16～24数量相对稳定，24后的数量开始下降，至192值逐渐恢复到对照组水平。 　　3组给药16后开始出现死鱼，解剖后可见肾脏有出血迹象，这与等［10］观察到的使海鲷肾脏点状出血现象一致。 　　本实验还发现3、1组鲫食欲明显减退，而且体色明显深于其它组鲫。 　　22对鲫血浆生化成分的影响表2为口灌后鲫血浆中钙离子2+、总胆红素、总蛋白、碱性磷酸酶、丙氨酸氨基转移酶和白蛋白6种生化成分的变化。 　　单因素方差分析显示，、2+、、和5个指标无组间显著性差异，而指标则存在组间显著性差异＜005。 　　组鲫浓度显著低于对照组和空白组;组鲫与、组相比虽有所下降，但并不显著;而组鲫的浓度为418，与、组接近。 　　表明高剂量会降低鲫鱼血浆浓度，浓度越高，这种作用越明显;而低剂