化妆品中诺氟沙星等10种抗真菌类禁用物质的检测方法.DOC

PAGE \* MERGEFORMAT1 附件1： 化妆品中诺氟沙星等10种抗真菌类禁用物质的检测方法 （征求意见稿） 1 适用范围 本方法规定了采用液相色谱-串联质谱法测定化妆品中10种禁用物质：依诺沙星（CAS号：74011-58-8）、氟罗沙星（CAS号：79660-72-3）、氧氟沙星（CAS号：82419-36-1）、诺氟沙星（CAS号：70458-96-7）、培氟沙星（CAS号：70458-92-3）、环丙沙星（CAS号：85721-33-1）、恩诺沙星（CAS号：93106-60-6）、沙拉沙星（CAS号：98105-99-8）、双氟沙星（CAS号：98106-17-3）、莫西沙星（CAS号：151096-09-2）的检测方法。 本方法适用化妆品中禁用物质：依诺沙星、氟罗沙星、氧氟沙星、诺氟沙星、培氟沙星、环丙沙星、恩诺沙星、沙拉沙星、双氟沙星、莫西沙星含量的测定。 2 方法提要 样品经过提取后，用液相色谱-串联质谱法测定，以多反应离子监测模式进行监测，采用特征离子丰度比进行定性，待测化合物峰面积定量，以标准曲线法计算含量。本方法的检出限、定量限和取样品0.5 g时的检出浓度、定量浓度见表1。 表1 各违禁成分的检出限和检出浓度 化合物 检出限（ng/mL） 定量限（ng/mL） 检出浓度(μg/g) 定量浓度(μg/g) 依诺沙星 10 20 0.5 1 氟罗沙星 4 10 0.2 0.5 氧氟沙星 10 20 0.5 1 诺氟沙星 10 20 0.5 1 培氟沙星 4 10 0.2 0.5 环丙沙星 4 20 0.2 1 恩诺沙星 1 2 0.05 0.1 沙拉沙星 2 4 0.1 0.2 双氟沙星 4 10 0.2 0.5 莫西沙星 4 10 0.2 0.5 3 试剂和材料 除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为去离子水。 3.1 乙腈，色谱纯。 3.2 甲醇，色谱纯。 3.3 40%乙腈溶液[φ（乙腈）= 40%]：量取40 mL乙腈于100 mL量瓶中，加入1 mL甲酸溶液，用水稀释并定容至刻度，摇匀。 3.4 3.3 饱和氯化钠溶液，称取40 g 氯化钠，置于250mL磨口锥形瓶中，加入100 mL水，超声15分钟，即得。 3.5 2%甲酸溶液：量取200mL水于500mL量瓶中，加入10mL甲酸溶液，用水稀释并定容至刻度，摇匀。 3.6 混合标准储备溶液[?（待测成分）= 1 mg/mL]：精密称取依诺沙星、氟罗沙星、氧氟沙星、诺氟沙星、培氟沙星、环丙沙星、恩诺沙星、沙拉沙星、双氟沙星、莫西沙星对照品10 mg（精确至0. 1 mg）置于同一10 mL量瓶中，加40%乙腈溶液（3.3）使溶解并定容至刻度，摇匀，即得质量浓度为1 mg/mL的混合标准储备溶液。 3.7 系列浓度标准工作溶液：用40%乙腈（3.3）稀释混合标准储备溶液，精密配制得质量浓度为10，25，50，100，200，500 μg /mL的系列浓度标准溶液。 4 仪器 4.1 液相色谱-三重四极杆质谱联用仪。 4.2 分析天平：感量0.0001 g。 4.3 分析天平：感量0.00001 g。 4.4 超声波清洗仪。 4.5 离心机。 4.6 涡旋混合仪。 5 测定步骤 5.1 样品处理 准确称取样品约0.5 g（精确至1 mg），置于25 mL比色管中，加入1 mL饱和氯化钠溶液（3.4），涡旋30 s后加入2%甲酸（3.5）15 mL，涡旋10 s后，加入乙腈（3.1）5mL，涡旋30 s，超声提取30 min，加入乙腈（3.1）定容至刻度，涡旋1min，4500 rpm离心5min，取上清液经0.45 μm微孔滤膜过滤后，滤液作为待测液备用。 5.2 系列浓度基质标准工作溶液制备 准确称取空白样品约0.5 g（精确至1 mg），置于25 mL比色管中，分别加入系列浓度标准工作溶液（3.7）50 μL，按照“5.1 样品处理”步骤进行前处理，即得质量浓度为1，2.5，5，10，20，50 μg /g的系列浓度基质标准曲线工作溶液（随行基质标准曲线采用的空白样品的性状应与待测化妆品基本一致）。 5.3 液相色谱-三重四极杆质谱联用分析条件 5.3.1 色谱条件 色谱柱： 十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱 (3.5 μm, 2.1*100mm)。 流动相：溶液A：0.2%甲酸水，溶液B：乙腈（含0.2%甲酸），梯度程序见表2， 表2 流动相的梯度程序 时间（min） 溶液A（%） 溶液B（%） 0 90 10 3 90 10 7 70 30 9 20 80 9.5 90 10 16 90 10 流速：0.4 mL/min；柱温：30 ℃；进样量：1 μL。 5.3.2 质谱参考条件 离子源： 电喷雾离子源（ESI源）； 喷雾压