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南方农业学报JOURNALOFSOUTHERNAGRICULTURE2012，43(6)：733—737
ISSN2095—1 NNXAAB
191；CODEN http：／／www．nfnyxb．corn
DOI：10．3969／j：issn．2095-1191．2012．06．733
干旱胁迫下甘蔗苗期根系全长cDNA文库构建及
EST序列分析
罗海斌1，曹辉庆1，魏源文p，邓智年1，潘有强1，郭元元1，何海波1，李杨瑞1’2+
(1广西作物遗传改良生物技术重点开放实验室；2农业部广西甘蔗生物技术与遗传改良重点实验室，南宁530007)
摘要：【目的】构建甘蔗根系全长cDNA文库，并进行测序，为分离克隆甘蔗抗旱候选基因奠定基础。【方法】在干旱
胁迫条件下，以新台糖22号甘蔗根系为材料，采用SMART技术构建cDNA文库，并进行EST序列分析。【结果】文库构建
质量鉴定结果显示，文库库容量为1．Oxl06PFU／mL，重组率约95％，文库插入片段长度在500～2000bp，平均长度约
1102．1
bp。挑选526个阳性克隆进行单向测序后，共获得523个ESTs序列，去除载体、接头序列以及长度低于100bp的
439个，分别占总数的6．5％和93．5％。通
序列后，进行聚类分析并组装，共得至11468个Uni—ESTs，其中congtig29个，singlets
过与NCBHE冗余蛋白库进行BLASTX
获得一批新的未知蛋白功能基因。
关键词：cDNA文库；甘蔗；根系；表达序列标签；测序
中图分类号：$566．1 文献标志码：A 文章编号：2095—1191(2012)06—0733—05
Constructionof eDNA anditsEST
full-lengthlibrary sequence
in rootat under stress
analysissugarcaneseedlingstage drought
LUO
Hai—binl，CAP1，WEIYuan—wen”，DENGZhi-nianl，PAN1，
Hui—qing You—qiang
GUO Hai-b01，LI 1，2+
Yuan-yuanl，HEYang-rui
Genetic and andGenetic
(1GuangxiCrop ImprovementBiotechnologyLab；2KeyLaboratoryofSugarcaneBitechnotogy
530007，China)
Improvement(Guangxi)，MinistryofAgricuhrue，Nanning
wasconductedtoconstructcDNA of root and
Abstract：【Objective】Thepresentexperiment librarysugarcanelength
isolation
to referreneeon andcloneof
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