纳豆芽孢杆菌B4对Caco-2细胞活性黏附与细胞因子-动物营养学报.PDF

动物营养学报２０１４，２６（１）：２７９２８６ ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｎｉｍａｌＮｕｔｒｉｔｉｏｎ 　 ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００６２６７ｘ．２０１４．０１．０３６ 纳豆芽孢杆菌Ｂ４对 Ｃａｃｏ２细胞活性、 黏附与细胞因子分泌的影响 尚沁沁　黄　琴　徐　歆　史艳云　李卫芬　余东游 （浙江大学动物科学学院饲料科学研究所，农业部华东动物营养与饲料重点实验室，杭州 ３１００５８） 摘　要：本试验以Ｃａｃｏ２细胞为体外模型研究纳豆芽孢杆菌Ｂ４对其活性、黏附与细胞因子分 泌的影响。采用台盼蓝排斥试验和乳酸脱氢酶细胞毒性检测研究纳豆芽孢杆菌Ｂ４对Ｃａｃｏ２ 细胞活性的影响；采用荧光标记法评价大肠杆菌Ｋ８８和霍乱沙门氏菌的黏附性能，并通过竞争、 排斥和置换试验检测纳豆芽孢杆菌Ｂ４对这２株病原菌黏附的阻断作用；采用酶联免疫试剂盒 测定Ｃａｃｏ２细胞分泌的细胞因子含量。结果表明：１）纳豆芽孢杆菌Ｂ４对Ｃａｃｏ２细胞存活率无 显著影响（Ｐ＞０．０５），且对其无毒害作用。２）纳豆芽孢杆菌Ｂ４对大肠杆菌Ｋ８８和霍乱沙门氏 菌黏附Ｃａｃｏ２细胞的黏附率无显著影响（Ｐ＞０．０５），且对这２株病原菌黏附Ｃａｃｏ２细胞无阻 断作用。３）纳豆芽孢杆菌Ｂ４极显著提高了Ｃａｃｏ２细胞分泌促炎细胞因子增殖诱导配体含量 （Ｐ＜０．０１），对白细胞介素 －６和白细胞介素 －８含量无显著影响（Ｐ＞０．０５），极显著降低了 Ｃａｃｏ２细胞分泌抗炎细胞因子白细胞介素－１０含量（Ｐ＜０．０１）。综上所述，纳豆芽孢杆菌Ｂ４ 对Ｃａｃｏ２细胞无毒性，对大肠杆菌Ｋ８８和霍乱沙门氏菌黏附Ｃａｃｏ２细胞无阻断作用，可通过调 节Ｃａｃｏ２细胞的细胞因子分泌发挥一定的免疫功能。 关键词：纳豆芽孢杆菌；Ｃａｃｏ２细胞；细胞活力；黏附；细胞因子 中图分类号：Ｓ８１６　　　　文献标识码：Ａ　　　　文章编号：１００６２６７Ｘ（２０１４）０１０２７９０８ ［１］ 等功能［６－７］ 　　益生菌是指对人畜有益的活体微生物 。外 。研究表明，在饲粮中添加纳豆芽孢杆 源性益生菌进入肠道后，通过促进机体肠道微生 菌Ｂ４可提高肉鸡的平均 日采食量和平均 日增 态平衡、增强机体免疫力、维持养殖生态平衡，最 ［８］ ［９］ 重 ，促进仔猪肠道乳酸菌定植 ，提高鱼的非特 终达到促生长和提高抗病力等益生作用，并具有 ［１０］ 异性免疫 等。目前，关于益生菌对机体免疫影 无毒性、无残留、无耐药性以及无环境污染等优 响的研究多集中于乳酸菌，而针对纳豆芽孢杆菌 ［２］ 点 。益生菌主要通过免疫调节（增强肠道免疫、 的研究较少。因此，有必要系统、深入地研究饲用 ［３］ 活化全身免疫系统及减轻炎症反应） 和非免疫 纳豆芽孢杆菌的作用机理，特别是其提高动物免 ［４］ 调节（改善肠道微生态平衡和肠道形态结构） ２ 疫功能的机理。本试验拟研究纳豆芽孢杆菌 Ｂ４ 种途径改善动物肠道健康，从而促进动物生长。 对Ｃａｃｏ２细胞活性、黏附与细胞因子分泌的影响， 纳豆芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓｖａｒ．ｎａｔｔｏ）Ｂ４是枯 旨在探索该菌株对肠黏膜免疫功能的调控机理， ［５］ 草芽孢杆菌的一个亚种 ，可分解大分子物质如 从而为纳豆芽孢杆菌在畜牧生产中的应用提供科 蛋白质、碳水化合物、脂肪等，促进营养物质的消 学依据。 化吸收，同时具有抗癌、抗菌、抗氧化、降低胆固醇