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毕业设计开题报告
应用化学
西兰花活性物质最佳提取条件研究
选题的背景和意义
西兰花又称绿菜花、绿花椰菜、青菜花、美国花菜等,为十字花科芸苔属甘蓝变种,一二年生草本植物,原产于地中海东部沿岸地区,长势强健,耐热性和抗寒性都较强。西兰花营养丰富,含蛋白质、糖、脂肪、维生素和胡萝卜素,营养成份位居同类蔬菜之首,被誉为“蔬菜皇冠”。西兰花富含黄酮类等植物次生代谢产物,具有抗氧化清除自由基能力,是有名的抗癌蔬菜芦。
西兰花是含有类黄酮最多的食物之一,类黄酮除了可以防止感染,其中有药用价值的化合物很多,能降低血管的脆性,用于调节和防治老年高血压和脑溢血,用于冠心病、心绞痛的治疗,有扩张冠状血管、增加冠脉流量的作用,还是最好的血管清理剂,能够阻止胆固醇氧化,防止血小板凝结,许多黄酮类成分还具有止咳、祛痰、平喘、抗菌的活性。
随着科技水平的提高,对于生物活性物质的提取方法很多,以选择操作简单、成本低、效果好的方法为主,并根据正交试验设计原则,设计正交试验表,分析各个因素水平对提取产物的影响,选择最优的条件组合。目前主要的提取方法有微波提取法、有机溶剂提取法、超临界萃取法、酶辅助提取法、超声波辅助提取法等。
甲醇和乙醇是最常用的黄酮类化合物提取溶剂,高浓度的醇(如90%左右)适宜于提取苷元,60%左右浓度的乙醇或甲醇水溶液适宜于提取苷类。
超声波法提取黄酮类物质, 是目前比较新的方法。其原理主要是利用超声波在液体中的空化作用加速植物有效成份的浸出,提取时无需加热,对有效成分具有保护作用。
随着科技的发展,对黄酮类化合物的研究已成为国内外食品、医药界研究的热门课题, 是一类具有广泛开发前景的天然活性成分,对黄酮类化合物的提取方法进行研究也是十分必要的。
研究目标与主要内容(含论文提纲)
本实验的主要目标是研究西兰花活性物质的最佳提取条件。
结合文献资料,本实验拟利用不同浓度的乙醇溶液在不同温度,不同固液比,不同提取时间下进行热浸提法提取西兰花的生物活性物质,利用不同浓度的甲醇、乙醇、丙酮在不同提取时间,不同超声波功率下进行超声波法提取西兰花的生物活性物质。并通过芦丁标准曲线法测定提取物的黄酮含量来评价活性物质的含量,并进行实验比较得出最佳的提取条件,因此,本实验的主要内容包括:
1.不同条件下利用热浸提法和超声波法提取西兰花的生物活性物质;
2.利用NaNO2-Al (NO3) 3-NaOH光度法测的各个条件下黄酮的得率。
3. 根据正交试验设计原则,设计正交试验表,分析各个因素水平对提取产物的影响,选择最优的条件组合。
拟采取的研究方法、研究手段及技术路线、实验方案等
本文利用西兰花在不同条件下利用热浸提法和超声波法对黄酮进行提取,再利用NaNO2-Al (NO3) 3-NaOH光度法测黄酮的得率,并设计正交试验表,选择最优的条件组合。
黄酮的提取
(1)不同条件下利用热浸提法提取黄酮
准确称取9份1.5g的西兰花干粉分别置于容积均为100ml 烧瓶内 ,以不同液固比例加入不同浓度乙醇水溶液在不同温度下回流提取后过滤。滤渣以同样条件提取、过滤,合并滤液,然后用相应浓度的乙醇水溶液定容后备用。
(2)不同条件下利用超声波法提取黄酮
准确称取9份2g的西兰花干粉分别置于容积均为100ml 烧瓶内 ,以液固比例为1:15分别加入不同浓度的甲醇、乙醇、丙酮在不同超声功率下超声提取后过滤。滤渣以同样条件提取、过滤,合并滤液,然后用相应浓度的提取液定容后备用。
2、利用NaNO2-Al (NO3) 3-NaOH光度法测黄酮的得率
(1)芦丁标准曲线的制备
准确称取120 ℃干燥并恒重的芦丁标准品25mg ,加入75 %的乙醇溶液80ml ,加热溶解,冷却后用75 %乙醇定容至100ml ,摇匀备用,配置成浓度为0. 25mg/ ml 的芦丁标准溶液。采用NaNO2 -Al (NO3) 3 - NaOH 光度法制作标准曲线。精密吸取0、2ml 、3ml 、4ml 、5ml 、6ml 、7ml 上述芦丁标准溶液,分别放置在25ml 的容量瓶中,加5 %亚硝酸钠1ml 摇匀放置6min ,加10 %的硝酸铝1ml 摇匀放置6min ,加4 %的氢氧化钠10ml ,用75 %的乙醇释至刻度,放置15min 后测吸光度。以吸光度为纵坐标、芦丁标准液浓度为横坐标,绘制标准曲线。
(2)得率的计算
取1ml定容后的提取液置于25ml容量瓶中,加5%亚硝酸钠1ml 摇匀放置6min ,加10 %的硝酸铝1ml 摇匀放置6min,加4%的氢氧化钠10ml,用90%的乙醇释至刻度,放置15min 后测吸光度,再根据标准曲线得到浓度C。故得率Y=C×V×25ml/1ml×0.001mg/μg/M.其中Y--得率,
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