固醇携带蛋白2与胆固醇结石关系的研究-中西医结合临床专业论文.docxVIP

天津医科大学博士研究生学位论文英文缩略词语表 天津医科大学博士研究生学位论文 英文缩略词语表 ACAT acy[-CoA：cholesterol acyltransferase 酰基辅酶A：胆固醇酰基转移酶 BMI body mass index 体重指数 C7H cholesterol 7a-hydroxylase 胆固醇7d．羟化酶 CHO cholesterol 胆固醇 DMSO dimethylsulfoxide 二甲基亚砜 HCD high cholesterol diet 高胆固醇膳食 HDL—c high density lipoprotein cholesterol 高密度脂蛋白胆固醇 LDL--c low density lipid cholesterol 低密度脂蛋白胆固醇 HMGR 3-hydroxy-3-methygltaryl-CoA reductase 羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶 LI lithogenic index 成石指数 LVT lovastatin 洛伐他丁 nsLTP nonspecific lipid transfer protein 非特异性转脂蛋白 PCR Polymerase Chain Reaction 聚合酶链反应 RT Reverse Transcription 逆转录 SCP2 sterol carrier protein 2 固醇携带蛋白2 SNP single nucleotide polymorphism 单核苷酸多态性 SSCP single strand conformation polymorphism 单链构象多态性 TG triglyceride 甘油三酯 UDCA ursodeoxycholic acid 熊去氧胆酸 天津医科大学博士研究生学位论文摘要 天津医科大学博士研究生学位论文 摘要 胆囊胆固醇结石是一种常见病，在我国其发病率呈上升趋势。同时胆囊 胆固醇结石的种族、家族聚集现象和术后复发现象也日益引起有关学者的注 意。有些学者分别从结石相关基因、胆固醇代谢紊乱、胆囊收缩功能异常、 载脂蛋白基因多态性、胆道细菌感染等各方面进行研究，试图揭示成石性胆 汁形成原因，但未能达成共识。胆囊胆固醇结石形成的首要条件是肝脏分泌 成石性胆汁。固醇携带蛋白2(sterol carrier protein 2，SCP2)～方面作为胆 固醇代谢的调节因子，参与胆固醇的生物合成和胆固醇向胆汁酸、胆固醇酯 及类固醇激素的转化：另一方面作为胆固醇转运器，参与细胞内、质膜间胆 固醇的运输，并能将肝脏新合成的胆固醇直接从内质网快速转运至胆汁，促 进成石性胆汁的分泌乃至结石形成。本研究试图在基因水平揭示SCP2与胆固 醇结石的关系，并初步探讨清热利胆中药对SCP2转录的影响。 我们运用分子生物学方法，检测了胆固醇结石患者和非胆固醇结石患者 SCP2基因部分启动子、全部外显子和部分3。未翻译末端序列，检测了胆固醇 结石患者和非胆固醇结石患者肝组织及血液SCP2 mRNA的表达情况，并在 此基础上．利用高胆固醇膳食(high cholesterol diet，HCD)复制家兔胆固醇 结石模型，观察了熊去氧胆酸(UDC)、洛伐他丁(LVT)、茵陈(YCH)和 复方中药(FZH)对SCP2mRNA表达的影响。通过实验，我们发现： 1．SCP2 mRNA在肝组织表达，而在外周血液不表达。胆囊胆固醇结石 患者肝组织SCP2 mRNA表达较非胆固醇结石组升高，差异有显著性意义； 肝组织SCP2mRNA在胆囊胆固醇结石患者的表达无年龄和性别差异。 2．SCP。基因第14外显子检出变异DNA单链泳动条带，突变率为53．45％；。 部分病例PCR产物直接测序证实为+284位G—A碱基颠换，为同义突变。 3．高胆固醇糟食饲养家兔四周，成石率达85．71％；UDC组成石率为 50．00％；LVT组成石率高达100％；YCH组和FZH组成石率均为42．86％。各实 验组家兔与对照组相比，肝组织SCP：mRNA表达水平均有不同程度升高，YCH 组和FZtt组SCP。mRNA表达与HCD组相比差异有显著性意义。除UDC组外，其 ——’—— 天津医科大学博士研究生学位论文 天津医科大学博士研究生学位论文 余各组动物肝组织SCPzmRNA表达均与本组胆汁成石指数(1ithogenic index， LI)呈诈相关。 从实验结果我们可得出下列结论： 1．SCP2 mRNA表达具有组织特异性；胆固醇结石患者肝组织SCP2 mRNA表达水平升高；SCP2基因过度表达可能是胆汁胆固醇过饱和乃至结石 形成的重要原因。8C