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OFSOUTIIERNAGRICULTURE
南方农业学报JOURNAL 2012．43(10)：1584—1589
ISSN2095—1 NNXAAB
191；CODEN
DOI：10．3969／j：issn．2095-1191．2012．10．1584
RGreen
牛分枝杆菌SYB I实时荧光定量
PC
R检测方法的建立
谢志勤1，谢芝勋P，刘加波1，庞耀珊1，邓显文1，谢丽基·，
彭 宜1，范 晴1， 牟群2，莫文胜3
(1广西兽医研究删广西畜禽疫苗新技术重点实验室，南宁530001；2桂林市动物疫病预防诊断中心，广西桂林541001
3永福县动物疫病预防诊断中“，广西永福541800)
Green
摘要：【目的】建立一种检测牛分枝杆菌的SYBR I实时荧光定量PCR，为防控牛结核病提供技术支持。【方
设计、各成分配比、样品采集及样品DNA提取等方面进行优化，并对建立的方法进行标准曲线、溶解曲线分析及特异
Green
性、敏感性、重复性、临床样品检验试验。【结果】牛分枝杆菌SYBR I实时荧光定量PCR的检测模板范围为1．0×10。～
Green
1．OxlO拷贝／t-LL时，其标准曲线呈良好的线性关系，溶解曲线表现为单一波峰，Tm值为86．48～86．65℃。SYBRI实时
荧光定量PCR的牛型分枝杆菌扩增结果为阳性，其他参试菌株均为阴性；可检测出10拷贝，皿的牛分枝杆菌DNA，敏感
Grccn
其结果与常规PCR检测结果一致。【结论】建立的SYBRI实时荧光定量PCR具有快速、便捷、准确等优点，适合于
牛分枝杆菌的鉴别诊断。
Green
关键词：牛结核病；牛分枝杆菌；SYBR I实时荧光定量PCR；检测
中图分类号：$858．23：$852．618 文献标志码：A
of R I for
SYBGREENreal-timePCRmethod
Development
boris
detectingMycobacterium
XIE Zhi—xun”，LIUJia—b01，PANGYao—shanl，DENGXian—wenl，
Zhi—qinl，XIE
XIE Yil，FAN
Li-jil，PENGQin91，MOUQun2，MOWen-shen93
Research ofAnimalVaccineandNew
(1GuangxiVeterinary Laboratory 530001，
Institute／GuangxiKey Technology，Nanning
Ani
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