猪圆环病毒2d亚型病毒样颗粒的制备.pdfVIP

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上海农业学报2017,33(6):4348 Acta AgricuhuraeShanghai 文章编号:1000.3924(2017)06-043-06 猪圆环病毒2d亚型病毒样颗粒的制备 夏 叶1,郭佳宏1,廖学文1,李春华1,易建中1,凌红丽2,蒋贻海2,缪德年h (1上海市农业科学院上海种猪工程技术研究中心,上海201106;2青岛蔚蓝生物股份有限公司,青岛266001) 达及产物的可溶性进行分析,利用Westernblot和琼脂凝胶免疫扩散试验鉴定重组蛋白的免疫原性,并利用电镜 blot和琼脂凝胶 效可溶性表达;电镜下观察超声破碎后的上清中存在大量直径约17am的病毒样颗粒;Western 免疫扩散试验结果表明该可溶性蛋白可与猪PCV2阳性血清特异性结合,具有较好的免疫原性。本研究为制备 PCV2d亚单位疫苗和相关检测试剂盒奠定了基础。 关键词:猪圆环病毒2d亚型;ORF2基因;可溶性表达;病毒样颗粒 中图分类号:$859.79文献标识码:A of circovirus2dvirus—like Preparationporcine subtype particles XIA Yel,GUO Xue—wenl,LIChun-hual,YI Jia.hon91,LIAO Jiang.zhon91, LING De—nian。+ Yi—hai2,MIAO Hong—li2,JIANG ResearchCenter (1ShanghaiEngineering ofBreedingPig,ShanghaiAcademyofAgriculturalSciences, 201 VlandBiotechLimited 106,China;2 266001,China) Shanghai Qingdao Company,Qingdao orderto thevirus—like of circovirus ORF2 Abstract:In particlesporcine 2d(PCV2d),the prepare subtype ofPCV2dwas toboth ofPCV2dHB—MClstrain gene accordingCapprotein optimallysynthesized sequence theGeneBankandcodon of clonedintothe vector publishedby usageE.coli,and prokaryoticexpressionpET30a therecombinant thenthe wastransformedintothe (+)to get expressionplasmidpET30a—Cap2d,andplasmid hostE.coli asforthe tobe IPTGinduction.The

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