狂犬病病毒修饰基因组的构建.pdfVIP

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2019-04-09 发布于广西
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狂犬病病毒修饰基因组的构建.pdf

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新疆农业科学2010，47(6)：1236—1241 Sciences XinjiangAgricultural 狂犬病病毒修饰基因组的构建魏玉荣1，易忠1，符子华1，马素贞2，简子健2，胡尔玛西1，王海烽1，一，魏婕1，一，朱晶晶3 (1．新疆畜牧科学院善医研究所．鸟鲁木齐830000；2．新疆农业大学动物医学学院．鸟鲁木齐830052； 3．塔里木大学。新疆阿拉尔843300) 摘要：【目的】利用反向遗传学技术在DNA水平上构建了狂犬病病毒修饰基因组。【方法】提取狂犬病病毒 (Rabies 基因组序列设计引物，缺失狂犬病基因组霉区并在缺失位置插入人细胞色素C基因，再设计引物删除糖蛋白(G)胞质区(CD区)。缺失Q区及删除CD区时采用基因同源重组的方法进行。在缺失的霉区插入人细胞位点。【结果】获得含预期的人细胞色素c基因，同时缺失了cD区与霉区的质粒pBSK—LA。【结论】全基因组测序结果表明已成功构建了狂犬病病毒修饰基因组。关键词：狂犬病病毒；胞质区；田区；同源重组；人细胞色素c基因；反向遗传学中图分类号：S118；s851．655文献标识码：A 文章编号：1001—4330(2010}06—1236—06 of ConstructionGenomes．．RabiesVirusModified WEI Yu—ton91-YIZhon91，FUZi—hual，MASu—zhenz，JIAN Zi—jian2lHuermaxil， WANG Jiel”，ZHU Hai—fen91’2，WEI Jing—ji|193 830000 (1．InstituteofVeterinary ofAnimal I Science-XinjiangAcademy Sciences-UrumqiChina；2．College Animal of Medicine-XinjiangAgriculturalUniversity。Urumqi830052-China；3．TarimUniversity，AlarXinjiang 843300。China) virusmodifiedWB,8constructedattheDNAlevel thereverse Abstract：【Objective】Genomes—rabies by totalRNAasall for Wilt8extractedfrom RT—PCR geneticstechnology．【Method】Genomicamplificationtemplate oralvaccinestrain ofrabiesvirusandseveral of were to SRV9 pairsprimersdesignedaccordingSRV9genomie on ofrabiesvirus werelacked andthenthe sequencepublishedGenBank．尘regiongenome bydesignedprimers human C was