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2019-05-19 发布于江苏
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实验四细胞免疫.ppt

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实验四外周血单个核细胞的分离外周血单个核细胞的分离（Ficoll密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞）原理：外周血各种血细胞的密度不尽相同，利用淋巴细胞分离液（Ficoll）作密度梯度离心，使一定比重的细胞群按相应密度梯度分布，从而将各种血细胞加以分离。血液成分红细胞 T细胞血液血小板淋巴细胞 B细胞白细胞单个核细胞 NK细胞（PBMC）单核细胞多形核细胞嗜酸性粒细胞嗜碱性粒细胞中性粒细胞血液中各个成分密度红细胞 1.093g/ml 多形核细胞 1.092g/ml 单个核细胞 1.076g/ml（1.075~1.090）血小板 1.030~1.035g/ml Ficoll液 1.077±0.001 聚蔗糖+泛影葡胺方法：1、抽取外周血1ml+等量Hank’s液混匀放入A管 2、取Ficoll液2ml加入B管 3、吸管吸取A管内血沿倾斜的B管管壁缓慢加入 4、水平离心，室温，2000rpm，20min 5、吸取PBMC层移入另一试管 6、加足量稀释液充分洗涤，弃上清