单壁碳纳米管双壁碳纳米管及多壁碳纳米管的细胞毒性比较.DOC

单壁、双壁及多壁碳纳米管的细胞毒性研究 刘佳蕙a，王竞a，聂海瑜a，杨胜韬a，袁媛a，王海芳a, b,*，刘元方a, b a 北京大学化学与分子工程学院，北京100871 b 上海大学纳米化学与纳米生物学研究所，上海 200444 目的：近些年，典型纳米材料碳纳米管的毒性和毒性机理的研究受到各方面的关注。目前认为碳纳米管引起细胞毒性的机理主要包括：影响细胞凋亡、影响细胞周期、引起氧化应激和降低细胞粘附性等。对不同层数的碳纳米管的细胞毒性的比较的研究还非常少。本研究的目的就是比较单壁碳纳米管（SWNT）、多壁碳纳米管（MWNT）以及介于二者之间，在功能上又有着自身特性的双壁碳纳米管（DWNT）的细胞毒性，讨论碳纳米管的层数对碳纳米管毒性的影响。 方法：在细胞实验之前，首先用多种方法对三种碳纳米管进行了详细的表征，包括透射电镜（TEM），热重分析（TGA），Raman光谱和红外光谱等。选择的细胞模型为A549（人肺癌上皮细胞）和RAW264.7（小鼠淋巴瘤上皮细胞系）。检测的细胞毒性指标有：利用cck-8方法检测与碳纳米管共同孵育24 h后的细胞存活率，利用LDH方法检测碳管孵育后细胞膜完整性，利用DCF-DA方法检测细胞的氧化应激（ROS）水平，利用PI单染结合流式细胞术（FACS）检测细胞周期和细胞凋亡。 结果：所使用的三种未进行修饰的碳纳米管的长度均为1-5 μm，含碳量都超过90%，结构完整，表面所含官能团很少。两种细胞系对于三种碳纳米管的响应有所差异：对于A549细胞，碳纳米管按照SWNT、DWNT、MWNT的顺序毒性逐渐减弱。巨噬细胞RAW264.7对碳纳米管较耐受，只有SWNT在200 μg/mL的时候引起了显著的细胞毒性。 结论：在其它性质基本相同的条件下，不同碳纳米管的毒性顺序总体为SWNTDWNTMWNT；不同的细胞系对碳纳米管会显示不同的耐受程度。 关键词： 碳纳米管、细胞毒性、氧化应激、凋亡