仙人掌多糖中单糖组成的气相色谱分析.docVIP

第7卷第6期甲国食品字加 Vol. 7 No. 62007^12^ Journal of Chinese Insliluic of Food Science and Technology Dee. 2007 仙人掌多糖中单糖组成的气相色谱分析 尤玉如袁海娜1刘士旺I储小军2 (浙江科技学院生物与化学工程学院杭州310012 2浙江贝因美科工贸股份有限公司杭州310007) 从仙人掌茎中提取多糖?并采用S叩erdexT巴00、SaphacrylS- 100HR. Sephadex G- 100凝胶柱层析法分离得到 2个多糖组分(OPS I和OPSII),它们均为化学均一物质；用气相色谱法分析仙人掌多糖OPS I和OPSII的单糖组成, 结果表明：OPSI主要由鼠李糖.葡萄糖和半乳糖组成:OPSII主要由岩藻糖、木糖和葡萄糖组成。 关键词仙人掌多糖分离气相色谱单糖 1009- 7848(2007)06- 0136- 05 仙人掌(Opuntia)为仙人掌科(Cactaceae)仙人掌属】材料和方法 植物、野生或栽培，全世界约有250 植物、野生或栽培，全世界约有250种-役 1.1材料仙人掌:购于杭州萧山云祥食用仙人掌开 其在我国主要分布于云南.贵州.广东.福建等地。 仙人掌的药用历史悠久，具有行气活血.清热解毒功 中心。 能。仙人掌中含有的仙人掌多糖是其具有多种药用功效 标准单糖:L(?)岩藻糖,Sigma产品;D(+)木 的原因之一。 糖、鼠李糖?国药集团化学试剂有限公司产品;D甘 目前国内外对仙人掌多糖的研究才刚刚起步. 露糖、上海］白奥生物科技有限公司产品;D-半乳糖, 研究内容主要集中于仙人掌多糖的提取和分离，但 上海恒信化学试剂有限公司产品;D-葡萄糖?广东 较高纯度的仙人掌多糖尚未见报道。对仙人掌多糖 光华化学厂产品。 的组成.结构以及生理活性等的研究也尚未开展。 仪器:AKTA purifier 100 层析仪(Superdex? 对单糖组成的分析是糖类物质硏究中的一项重要内 200(10 mmx 300 mm) x SaphacrylS- 100HR(l() 容。本文采用水提醇沉法提取仙人掌 容。本文采用水提醇沉法提取仙人掌 mmx 300 mm) x Sephadex G-100(10 mm x 300 多糖，并通 1S Superdex?200 x SaphacrylS- 100HR. mm), Amersham). GC- 6820 Agilent 气相色谱仪。 Sephadex G- 100凝胶层析法进行分离、纯化，旨在为仙I?2方法 人掌多糖的开发、应用提供依据。 121仙人掌粗多糖的制备-5) 滤渣 新鲜仙人掌一 匀浆一＞ 溶剂浸提一 过滤一＞ 合并滤液一＞ 减压浓缩 一＞ 除蛋白 乙醇沉淀一＞ 真空冷冻干燥一＞ 粗多糖 1.2.2 1.2.2仙人掌多糖的分离纯化 min离心5 min,取上清液,过滤,脱气备用。以0.1 Superdex?200凝胶柱层析将彳山人掌粗多 糖溶解于0」mol/L NaCl溶液中，10 000 r/ mol/L NaCl溶液平衡凝胶柱4 h。进样2 mL,用 0.1 mol/L NaCl 溶液洗脱,流速 1 mL/min, 2 mL/管 自动收集,用蔥酮■硫酸法⑹测定多糖含量。以管数 :2007- 03- 30 为横坐标,吸光值为纵坐标作图。收集、合并主糖 基金项目：杭州市科技攻关项目(NO21)；杭州市重大科技 峰的洗脱液，真空冷冻干燥后得白色多糖粉末，命名 招标项目(No05) 为 ops I 和 opsn0 :尤玉如.男? 1957年岀生教授 仙人掌多糖中单糖组成的气相色谱分析 仙人掌多糖中单糖组成的气相色谱分析 第7卷第6期 SaphacrylS- 100HRx Sephadex G- 100 凝胶 柱层析°将ops i si opsn分别溶解于0.1 mol/L NaCl 溶液中，经 SaphacrylS-100HR、 Sephadex G- 100凝胶柱层析分离，以0」mol/L NaCl溶液洗脱,采用蔥酮-硫酸法测定总糖含量。 1.2.3仙人掌多糖的单糖组分分析 123.1标准品的测定冋称取1() mg固体单糖样品、 10 mg盐酸轻胺.加入0.5 mL毗噪，放入90 °C水浴 中加热反应30 min,间歇振荡。取出后冷却至室温, 加入0.5 mL醋酸酹,90 °C下继续反应30 min(乙酰 化)，反应产物直接作气相色谱分析。记录各标准单 糖的保留时间(RT)。 1.2.3.2样品的测定丄川①样品的水解：分别称取适 量仙人掌多糖OPS I和OPSII粉末于安培瓶中，加 入2 mol/L三氟乙酸，封管：100