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课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
一、课题目标
研究培养基对微生物的选择作用,进行微生物数量的测定。
二、课题重点与难点
课题重点:对土样的选取和选择培养基的配制。课题难点:对分解尿素的细菌的计数。
学生活动
教师组织与引导
教学意图
引导学生阅读教材P21-22筛选菌株
引导学生阅读教材P22设置对照
教师安排学生讨论。
引导学生阅读教材P22《(二)统计菌落数目》
引导学生观察教材P23图2-7样品的稀释和稀释液的取样培养流程示意图
引导学生阅读教材P25〈操作提示〉
通过上一节课的学习,我们知道,微生物和我们人类的关系非常紧密。目前,微生物在工业、农业、环境保护和医疗卫生方面有广泛的应用。我们也知道研究微生物最基本的方法是对微生物进行培养、分离和计数。在上一个课题中,我们已经学习了微生物培养的原理和方法。在本节课中,我们将继续学习微生物的分离和计数。但是,微生物种类有很多,我们选择哪一种微生物来分离和计数呢?
--引导学生阅读P21课题背景
请看:[CO(NH2)2]这是大家都知道的一种物质:尿素。
今天,我们就学习一下从土壤中分离尿素细菌,并且计算1g土壤中尿素细菌到底含有多少个?并以它为载体来学习微生物的分离和计数的原理和方法。这就是我们今天学习的课题2的学习目标(板书展示)
尿素细菌的分离;二、尿素细菌的计数。
师:要完成尿素细菌的分离,我们需要配制一个培养基。在上一课中我们学习了一个培养基的配制,叫什么培养基?生答:牛肉膏蛋白胨固体培养基。
师:我们选用牛肉膏蛋白胨培养基,能够从土壤中分离出尿素细菌吗?生答:不能。
师:为什么呢?生答:略
师总结:因为牛肉膏蛋白胨培养基上不仅有尿素细菌的生长,还有其他的微生物的生长,所以不可能分离出尿素细菌。(补充:含有多种微生物都能生长的培养基称为普通培养基)。
师:我们怎样才能从土壤中分离出尿素细菌呢?
生答:需要配制一种选择性培养基:只有尿素细菌能够在上面生长,而土壤中其他微生物是不能生长的。
师:根据刚才的分析,你能给选择性培养基下一个定义吗?
生答:选择性培养基是指在微生物学中,允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。
师展示(或引导学生阅读教材P22(二)统计菌落数目一面一小段并学生阅读明确定义):
讨论1:
培养基配方一: 培养基配方二: 培养基配方三:
KH2PO3 3g KH2PO3 3g Na2HPO3 1.4g
Na2HPO3 1.4g MgSO4·7H2O 3g MgSO4·7H2O 0.2g
NaNO3 2g NaNO3 2g 尿素 1.0g
MgSO4·7H2O 3g 葡萄糖 10.0g Na2HPO3 2.1g
葡萄糖 10.0g 尿素 3.0g 葡萄糖 10.0g
琼脂 15.0g 琼脂 15.0g 琼脂 1
分别加蒸馏水定容至于1000ml。
师:你认为,以上三个培养基配方中,哪个可以分离出尿离细菌?哪些不能分离出尿素细菌?原因是什么?
生分析配方一:任何细菌都能在上面生长。因为培养基配方中既提供了C源,又提供了N源,还有无机盐和水。
生分析配方二:不可以。因为尿素细菌利用的唯一N源是尿素,而该培养基配方中有NaNO3存在,也提供了N源。其他以NO3-作N源的微生物也能生长。
生分析配方三:不可以。因为尿素细菌可以把尿素分解成氨。而固N细菌又能利用空气中的N,我认为固N细菌也能在上面生长。因此,也分离不出尿素细菌。
{师:我们说,每种微生物的生长,都有特定的条件,需要特定的一些营养物质。我们配制的培养基也可能有利于固N微生物的生长,也可能不能。但它只要有尿素提供N源,肯定能保证尿素细菌生长。这涉及选择性培养基的有没有选择性的问题。(为了降低难度,固N菌问题可不作分析,整个实验过程中固N菌都无法排除)}引入--
引言:刚才,有的同学怀疑它没有选择性,不能选择出尿素细菌,还有其他的微生物。那你怎样设计一个简单的对照实验来证明呢?
讨论2:怎样设计一个简单的对照实验证明配制的选择性培养基具有选择性?
生答:将第三个培养基配方中的尿素去掉,其他的营养成分都保持不变,看一看,没有尿素的培养基有没有杂菌生长。如果有的话,证明第三个培养基中也会有杂菌生长。
师分析:根据同学的回答,对选择
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