固定化的β-半乳糖苷酶合成低聚半乳糖的分析-生物化工专业论文.docxVIP

摘 摘 要 B．半乳糖苷酶可以利用乳糖合成低聚半乳糖(COS)，用作功能性食品配料。D一 半乳糖苷酶固定化是工业化处理乳汽使其乳糖合成C,-OS的必要步骤。本论文研究8 ．半乳糖苷酶的固定化方法，以期获得性能良好的固定化酶，将其用于处理乳清合成 GOS。 将乳清粉用蒸馏水溶解复原成一定乳糖浓度的溶液作为实验样品。GOS得率使用 TLC法检测，TLC法的准确性用HPLC法进行确证，证明TLC法是检测CK)S的有效 方法。 选择壳聚糖作载体，戊二醛交联的方法固定化13．半乳糖苷酶，研究了固定化的最 适条件：确定出先固化后交联的顺序较好，4℃固定化6h，pH6．0，l％戊二醛室温交 联30min，加酶量为0．4mg／g干重壳聚糖珠，活力回收率达到26．43％，该结果不理想。 实验制备了海藻酸锷一明胶凝胶包埋法固定化酶，其最优条件为：高粘度海藻酸钠 2．54％，明胶0．88％，低粘度海藻酸钠0．24％时，凝胶获得最大的稳定性，重复使用次 数可以达到8次。经过戊二醛交联防止酶泄漏，并目提高了固定化酶的操作稳定性， 加酶量0．06％(w／v)，活力回收率最高可达80％，即固定化酶的比活力为15．1u位凝 胶。海藻酸钙凝胶包埋带恪的固定化酶最适温度为55。C，较游离酶高5C；最适口H 升高0．5个单位，耐热性和pH耐受性变宽，而且具有向碱偏移的趋巍这些特性有利 于固定化酶的直接使用。 利用海藻