免疫导向双功能小分子抗肿瘤药物的设计与评价-生物化学与分子生物学专业毕业论文.docxVIP

摘要摘要 摘要 摘要 肿瘤治疗药物中，除了常见的小分子放化疗药物或抗体阻断类药物外，还 有其他类型的药物，如双功能抗体，其特点是在识别肿瘤细胞的同时激发相应 的免疫机制，于肿瘤细胞和免疫系统间架起桥梁。这里我们从另一种角度，利 用小分子与其靶向受体的作用，设计了一类双功能的小分子，一端可以通过受 体．配体的作用靶向结合肿瘤细胞，另一端则利用小分子配基与其受体的多价作 用招募免疫杀伤性细胞，进而将免疫系统与肿瘤细胞关联起来，增强机体对肿 瘤的监视、控制与清除作用。 本论文以叶酸(FA)、c(RGDfK)这两个分子为肿瘤靶向配基，以mannose 单糖为另一端的配基，分别合成了FA．C8．Mannose、c(RGDfK)．C8．Mannose、 c(RGDfK)．C1000．Mannose---个化合物。选用叶酸受体高表达的Hela细胞、整合 素高表达的22Rvl细胞以及Mannose受体高表达的巨噬细胞Raw264．7，进行生物 学活性评价比较。结果表明，FA—C8．Mannose介导Hela细胞与巨噬细胞粘附， 半最大效应浓度(EC50)为75．39nM，但缺点是叶酸受体会很快地把双官能小 分子FA．C8．Mannose内吞进细胞，使得细胞粘附现象变得难以观察。而针对 c(RGDfK)一C8．Mannose$1]c(RGDfK)．C1000．MannoseF)可个化合物，通过比较介导 22Rvl细胞与巨噬细胞的粘附结果，我们发现c(RGDfK)．C8．Mannose介导细胞粘 附的EC50值为3．881aM，增长双功能的链子后，Kd值增加到1．269M左右，结合 力提升了3倍。 本论文利用三种不同的双功能小分子介导两种不同类型的肿瘤细胞与巨噬 细胞所发生粘附作用，说明该类小分子的确具有介导细胞粘附的能力，且通过 改变分子的结构，如中间链二子的加长，可很好地提升细胞间的粘附力，为进一 步开发免疫导向肿瘤治疗药物提供了新的思路，文中有很多实验设计和方法依 然有进一步完善和提高的空间。 关键词：双功能小分子，免疫导向治疗，抗肿瘤药物，细胞粘附，巨噬细 胞 AbstractAbstract Abstract Abstract Besides common small molecular radiotherapy and chemotherapy drugs or antibody drugs，there are many other types of oncology drugs，like bifunctional antibody,which can reco酽dze tumor cells and stimulate immune reaction by setting up a bridge between tumor cells and immune system．Here，in another view point， we used a kind of bifunctionM small molecule，which could bind to tumor cells through specific interaction of receptor-ligand at one end，and recruit immune killer cells through multivalent role of carbohydrate at the other end．Our purpose is to directly set up a bridge between the immune system and tumor cells，in order to increase the ablility of immune system to monitor and eliminate tumor． Here，Small molecule Folic acid(FA)and c(RGDfK)were chooesd as tumor targeting ligands，and mamlose as macrophage binding ligand．We synthesized three compounds including FA—C8一mannose， c(RGDtK)-C8-mannose and c(RGDIK)-C I 000-mannose．To evaluate their biological activity,we selected cells including Hela(highly expressing of folic acid receptor)，22Rv l(highly expressing o