ET-1和COX-在软骨肉瘤细胞中的高表达致细胞迁移-百替生物x.pptVIP

Endothelin-1 enhances cell migration through COX-2 up-regulation inhuman chondrosarcoma BBA 简介 * ET-1和COX-2在软骨肉瘤细胞中高表达，ET-1能诱导COX-2的表达，促进细胞移行。ET-1能诱导ERK、p38和JNK磷酸化，它们的抑制能减弱细胞移行和COX-2的表达。 Introduction 软骨肉瘤 软骨肉瘤是一种高度恶性肿瘤，有很强的局部侵入和远程转移能力。 内皮素-1（ET-1） 内皮素（endothelin，ET）是调节心血管功能的重要因子，?对维持基础血管张力与心血管系统稳态起重要作用，广泛存在于各种组织和细胞中。 环氧酶（COX） 是前列腺素(PGs)合成所必须的酶,也是PGs合成初始步骤中的关键性限速酶。有两种同工酶，COX-1和COX-2，COX-1是生理性酶，COX-2是诱导酶或病理性酶。 * Methods 细胞培养和转染 移行实验 损伤修复移行 IHC、WB、qRT-PCR、Chip siRNA和突变体转染 报告基因分析 体内肿瘤异种移植研究 * Results 1. ET-1通过ET受体调控软骨肉瘤细胞移行 A. ET-1的表达情况 * B. 不同浓度ET-1作用下软骨肉瘤细胞的移行能力。 * C. 不同浓度ET-1作用下细胞损伤修复能力。 * D. ET-1受体抑制剂处理后细胞移行能力。 BQ123：ETAR受体 BQ788：ETBR受体 * 2. ET-1诱导的细胞中COX-2高表达 IHC检测COX-2表达 不同时间及浓度ET-1处理后COX-2的表达 * C. 不同抑制剂处理的细胞移行能力 D. siRNA处理后细胞移行能力 COX-2抑制剂：Celebrex、NS-398 COX-1抑制剂：Valeryl salicylate COX抑制剂：Indomethacin * E. ET-1受体抑制剂处理后COX-2的表达 * 3. MAPK信号通路参与ET-1调控的细胞移行 A. ET-1诱导时ERK、p38和JNK的磷酸化情况。 * B. 抑制剂处理细胞后细胞移行情况。 D. 抑制剂处理细胞后细胞损伤修复能力。 U0126：ERK抑制剂 SB203580：p38抑制剂 SP600125：JNK抑制剂 * C. ERK、p38和JNK突变体处理后细胞移行情况。 E. 抑制剂处理后COX-2的表达情况。 * 4. AP-1参与ET-1诱导的细胞移行和COX-2表达 ET-1处理不同时间c-jun的磷酸化情况 AP-1抑制剂处理后细胞移行能力 * C. siRNA干扰后细胞移行能力 D. AP-1抑制剂处理后细胞损伤修复能力 * E. AP-1抑制剂处理后COX-2的表达 * * 5. ET-1过表达减少细胞移行和肺转移 Conclusion * ET-1在软骨肉瘤细胞中高表达，能促进细胞移行，其受体抑制后细胞移行减弱。ET-1的干扰能抑制COX-2的表达和细胞转移。 COX-2在软骨肉瘤细胞中高表达，能被ET-1诱导表达，呈时间和浓度依赖，抑制后细胞移行减弱。 ET-1能诱导ERK、p38和JNK磷酸化，它们的抑制能减弱细胞移行和COX-2的表达。 ET-1能诱导c-jun磷酸化，AP-1和c-jun的抑制减弱细胞移行和COX-2的表达，ERK、p38和JNK的抑制能减少p-cjun进入细胞核。 * Discussion ET-1 ETAR、ETBR MAPK信号通路 C-jun AP-1 COX-2 细胞移行 *