酪蛋白和乳球蛋白的抗体及酶标物制备研究.PDF

486 2008, Vol. 29, No. 12 食品科学 ※生物工程 宋宏新，柏红梅* ，薛海燕，马 冬，刘 静 ( 陕西科技大学生命科学与工程学院，陕西西安 710021) ：选用牛乳中的β- 酪蛋白( β-CN)和β- 乳球蛋白( β-Lg)为抗原对鸡体免疫，从鸡卵黄中用水稀释法及亲和 色谱(HiTrapTM IgY Purification HP)纯化特异性鸡卵黄抗体(IgY) 。PAGE 电泳分析IgY 纯度高达90%，ELISA 效价为 1:4096。用过碘酸钠氧化法进行抗原的过氧化物酶(HRP)标记， HRP 与β-CN 和β-Lg 的分子个数比分别为1:1 和 1.5:1 的标记效果最好，β-CN-HRP 和β-Lg-HRP 的效价高达1:640，其ELISA 工作浓度分别为1:80 和1:40。特异性 IgY 和酶标抗原为特异检测牛乳蛋白的酶联免疫吸附(ELISA)分析提供必要条件。 ：β- 酪蛋白( β-CN) ；β- 乳球蛋白( β-Lg) ；鸡卵黄抗体(IgY) ；抗原酶标；酶联免疫吸附 Preparation of β-Casein and β-Lacotoglobuli Antibodies and Enzyme-labeled Antigens SONG Hong-xin，BAI Hong-mei* ，XUE Hai-yan ，MA Dong ，LIU Jing (Institute of Life Science and Engineering, Shaanxi University of Science and Technology, Xian 710021, China) Abstract ：Hens were immunized with the antigen of bovine- β-casein ( β-CN) and β-lactoglobulin ( β-Lg), and the egg yolk immunoglobulin (IgY) of the hens was purified by the methods of water diluting and affinity chromatography (HiTrapTM IgY Purification HP). The purity of IgY is as high as 90% by PAGE and the ELISA titer is 1:4096. In the NaIO4 labeled method, the antigens were conjugated with horseradish peroxidase (HRP), respectively. The molar ratios between HRP and β-CN or β-Lg for the best labeling effect are 1:1 and 1.5:1, respectively. The β-CN-HRP and β-Lg-HRP titers are both 1:640, and their operation concentrations are 1:80 and 1:40, respectively. Key words ：β- casein ；β-lactoglobulin ；egg yolk antibody ；enzyme-labeled antigen ；ELISA 中图分类号：Q51 文献标识码：A 文章编号：1002-6630(2008)12-0486-04 牛乳及其乳制品由于营养价值高消费量大，已成为 酶标二抗为兔抗鸡IgG-HRP 北京塞驰生物科技有 人民生活必需食品[1] 。人们对食品营养与安全越来越高 限公司；过氧化物酶HRP 西安罗森伯生物科技有限公 的要求，使针对各种花样繁多的掺假检验方法成为乳品