鸡干扰素与干扰素受体重组蛋白的生物学特性及其相互作用-预防兽医学专业论文.docx

中文摘要干扰素是一种具有抗病毒、抑制细胞增殖和免疫调节活性的细胞因子，干扰素与干扰素受体 中文摘要 干扰素是一种具有抗病毒、抑制细胞增殖和免疫调节活性的细胞因子，干扰素与干扰素受体 结合后启动信号传导和干扰紊基因的转录。本文克隆并表达了惠阳胡须鸡IFN—a、IFN．B、 IFNARl、1FNAR2基因；首次克隆了鸡IFNGR2全长cDNA；分析了干扰素受体在外周血淋巴细 胞和各器官组织中的分布：并对IFN．a、1FN-B与其受体在体外的相互作用和重组蛋白的二级结 构进行了研究。 以肝脏DNA为模板，克隆了惠阳胡须鸡口附．q基因，与Genbank上]FN-a的同源性为 96．9％--97．9％，是一个新的亚型；克隆了惠阳胡须鸡IFN．B和AA肉鸡IFN．13基因，与白色来 亨鸡IFN-B的核苷酸序列同源性分别为99．84％、100％，目前鸡IFN-B尚未发现亚型的存在。构建 了鸡IFN-o／pGEX-6P．1和IFN．B／pGEX．6P．1重组质粒，在B121中诱导表达，可溶性蛋白通过 亲和层析得到纯化并采用Western．blot得到了鉴定。IFN．a、IFN．B重组蛋白具有较高的生物学 活性，在CEF／VSV系统中的抗病毒活性为7．9x 105U／rag和6．4×10U／mg。 从惠阳胡须鸡肝脏总RNA中扩增了I型干扰素受体的两个亚基：IFNARl、IFNAR2。惠阳 胡须鸡IF