加味天麻钩藤饮对SHR血压的影响及其肾脏保护作用的分析及机制探讨-中西医结合临床专业论文.docxVIP

PAGE PAGE 10 引 言 高血压肾损害是指高血压病导致的小动脉性肾脏硬化，以良性肾血管硬化为主。 现代医学研究高血压病至少可以通过两条作用途径：即高血压促进动脉粥样硬化形成 所致的肾组织缺血性病变，以及通过肾小球高压力和高灌注造成的肾组织的损伤。此 外，肾组织中细胞外基质的聚集及细胞因子均参与高血压所致肾动脉、肾小球及小管 间质的病变过程。有研究表明，高血压病对心脏、肾脏同时产生损害，损害程度具相 关性。现代医学常规治疗措施虽然能改善血流动力学，缓解部分症状，但不能影响高 血压肾损害的进程，并且 ACEI 和 ARB 类药物在肾功能损害达到一定程度时，其应 用受到限制，因此中医药治疗高血压肾损害成为值得探讨的途径。 肾损害早期，若积极治疗，肾功能是可以逆转的。因此，高血压病早期肾功能损 害的诊断和治疗是改善肾内血流动力学、延缓肾损害的关键。重视、加强高血压病肾 损害的研究，尤其是早期肾损害的研究，是目前一项重要的研究课题。近年来，许多 医家运用中医理论结合西药防治本病取得了较好疗效，初步显示了中医药防治本病的 潜在优势和广阔前景，但尚缺乏深入、系统的研究。 本实验利用自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rat，SHR)模型，应用加 味天麻钩藤饮 SHR 进行干预，观察加味天麻钩藤饮对肾早期损害指标(尿微量白蛋白、 尿β2 微球蛋白)的表达及其与肾损害关系的影响，为中药防治高血压肾损害提供客观 依据。 实验研究 一、实验目的 通过加味天麻钩藤饮对自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rat，SHR) 进行干预，观察加味天麻钩藤饮对 SHR 尾动脉收缩压、尿微量白蛋白(mALB)、尿β 2 微球蛋白(β2－MG)的影响，探讨其相关机制。 二、实验材料 （一）实验动物及饲料 自发性高血压大鼠 24 只，以及同周龄 WKY 大鼠 6 只，购自上海斯莱克实验动 物有限公司，许可证号 SCXK（沪）2007-0005。 实验鼠复合饲料：济南康大饲料有限公司生产，生产许可证号：鲁 （二）主要试剂 1．尿微量白蛋白放射免疫分析药盒：北京北方生物技术研究所。 2．尿β2 微球蛋白放射免疫分析药盒：北京北方生物技术研究所。 3．冰乙酸、75%酒精等常规实验试剂由山东中医药大学附属医院核医学科提供。 （三）药物 1．加味天麻钩藤饮：由天麻、钩藤、石决明、山栀子、黄芩，川牛膝、炒杜仲、 益母草、桑寄生、夜交藤、茯神、牡丹皮等药组成。由江苏江阴天江药业有限公司生 产成免煎细颗粒制剂，规格 4.2g/袋，生产批号 0909422。 2．福辛普利(蒙诺)：规格 10mg/片，由中美上海施贵宝制药有限公司惠赠。批准 文号：国药准字 （四）主要仪器 1．ZH-HX-Z 型大鼠尾动脉血压测量系统：淮北正华生物仪器设备有限公司。 2．BNP 全自动蛋白分析仪：西门子医学诊断产品(上海)有限公司。 3．台式离心机 TGL-16B：上海安亭科学仪器厂。 4．微量加样器、电子秤、实验所用常规手术器械由山东中医药大学与山东大学 医学院生理学研究所共同提供。 5．代谢笼由山东中医药大学提供。 6．752-C 紫外分光光度仪：上海仪器总厂。 三、实验方法 （一）动物饲养 实验过程中，各大鼠均单笼饲养于 SPF 级层流动物房大鼠独立通气动物笼(IVC) 内，每笼一只，标准颗粒饲料投喂，自由进食、饮水，固定时间测量体重。保持室内 通风良好，保持箱温 22℃一 23℃，相对湿度 50%~60%，12 小时保持照明，每周两 次更换鼠笼敷料。 （二）实验动物分组 将 24 只 15 周龄同源同系的雄性 SHR 适应性喂养 1 周，满 16 周龄后随机分组， 分为模型对照组、福辛普利组、加味天麻钩藤饮组（中药组）、联合用药组。6 只 WKY 大鼠做为正常对照。 （三）给药方法 1．计算大鼠用药等效剂量 各组 SHR 根据组别灌服相应干预药物，动物实验用药剂量换算，参照《药理实 验方法学》（徐淑云主编），大鼠等效剂量=人日用量(mg/kg)×70kg×0.018/200g（人和 动物间按体表面积折算等效剂量）。具体如下： 加味天麻钩藤饮人日用剂量=4.2/袋×6 袋=25.2g/d，加味天麻钩藤饮大鼠等效剂 量=25200mg/60kg×6.3=2646mg/kg 福辛普利人日用中效剂量=20mg/d，福辛普利大鼠日用中效剂量 =20mg/60kg×6.3 ≈2mg/kg/d 2．混悬液制备 将福辛普利片捣碎混于蒸馏水中制成混悬液备用，计算得 10mg/片福辛普利混于 25ml 蒸馏水；加味天麻钩藤饮符合大鼠等效剂量的 2 倍(5292mg/kg)，同时满足体重 最