几丁质酶基因及核糖体失活蛋白基因对水稻的遗传转化-植物学专业论文.docxVIP

摘 摘 要 水稻是世界上最重要的粮食作物之一，但容易受到多种真菌瘸害的侵染，使其产量和 品质受到严重的威胁。实践证明，最经济有效的、也是最根本的防治方法就是培育抗病品 种。常规育种由于品种选育年限长、抗源基因匿乏及随病源生理小种的变化抗病性消失等 原因，远不能满足选育抗瘸品种的需求。利用基因工程技术进行抗病育种是一条崭新而有 效的途径。但水稻抗真菌病基因遗传转化中仍存在单个抗病基因的抑茵谱窄等问题：另外， 现有的水稻遗传转化体系还存在着转化频率低等因素，难以获得大量的转基因植株。 本研究针对以上问题，构建菜豆几丁质酶基因与大麦核糖体失活蛋白基因双价植物表 达载体，通过农杆蘸介导法和基因枪法转化水稻(选用东北地区4个主栽水稻品种)，系 统优化植株再生条件和遗传转化条件，建立高效的植株再生体系和遗传转化体系。为水稻 以及其它禾本科植物抗病分子育种奠定基础，并为有性杂交育种提供基因资源。主要研究 结果如下： (1)构建单价和双价植物表达载体 共构建了5个载体，其中包括一个中间克隆载体pUchB．1个植物载体卡盒p33EG，2 个单基因植物表达载体p33EC、p33ECB，1个取价植物表达载体D33ECR。 (2)优化水稻再生体系 干燥处理可显著提高水稻愈伤组织的分化效率，当失去鲜重50％时．水稻愈伤组织分 化效率可提高2．¨．6倍。 通过改善移栽方法，显著提高了农杆菌转化抗性再生苗的移