生化室操作作业指导书.docVIP

生化室操作指导书 文件编号： 第一版 编制： 田 审核： 批准： 生效日期：200 省立医院西院检验科 目录 序号 主题内容 代号 页号 1 血清丙氨酸氨基转移酶测定 2 血清天门冬氨酸氨基转移酶测定 3 血清总蛋白液体双缩脲法测定 4 血清白蛋白溴甲酚绿法测定 5 血清葡萄糖己糖激酶法测定 6 血清甘油三酯酶试剂法测定 7 血清总胆固醇酶试剂法测定 8 血清高密度脂蛋白胆固醇测定 9 血清尿酸TBHBA法测定 10 血清尿素氮谷氨酸测定 11 血清肌酐苦味酸法测定 12 血清钙测定 13 血清氯测定 14 血清总胆红素测定 15 血清直接胆红素测定 16 血清α-淀粉酶测定 17 脑脊液、尿液微量蛋白测定 18 血清钾测定 19 血清磷测定 20 血清胆碱酯酶测定 21 血清碱性磷酸酶测定 22 血清γ-谷氨酰转移酶测定 23 血清乳酸脱氢酶测定 24 血清胆碱酯酶测定 25 血清肌酸激酶测定 26 血清肌酸激酶同工酶测定 27 血清二氧化碳结合力测定 28 血清总胆汁酸测定 29 血清β2-微球蛋白测定 30 血清低密度脂蛋白胆固醇测定 31 血清脂蛋白（a）测定 32 血清钠测定 33 34 35 36 血清丙氨酸氨基转移酶测定 实验原理 国际临床化学学会(IFCC)推荐的紫外连续监测法。 ALT LDH（乳酸脱氢酶）L-丙氨酸 + ?-酮戊二酸 丙酮酸 + L-谷氨酸 LDH（乳酸脱氢酶） 丙酮酸+ NADH + H+ L-乳酸 + NAD+ + H2O 上述偶联反应中， NADH的氧化速率与`样品中ALT的活力成正比,在340nm处NADH呈现特性吸收峰，而NAD+则没有。因此，可在340nm监测吸光度的下降速率（-△A/min）,计算出ALT的活性单位。 2. 标本： 2.1 病人准备：12小时禁食。 2.2 类型：血清，肝素或EDTA血浆。 3. 标本存放：3天内的活性损失：2～8℃保存：10%；15～25℃保存：17%；标本稳定性： 4. 标本运输：常温条件下保存运输。 5. 标本拒收标准：标本溶血、细菌污染的标本。 6. 实验材料 6.1 试剂 欧泰克 ALT测定试剂盒 6.1 Tris缓冲液 pH 7.4 80mmol/L L-丙氨酸 800mmol/L LDH（乳酸脱氢酶） ≥1200U/L a-酮戊二酸 18mmol/L NADH 0.18mmol/L 6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。 6.1.3 试剂稳定性与贮存：试剂保存于2～8℃ 6.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。 6.1.5 注意事项：试剂中含叠氮钠（0.95g/L）为防腐剂。不可入口！避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措施使用试剂。 6.2 校准品：使用罗氏公司提供的校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。 6.3 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。 7. 仪器：日立7060生化分析仪 8. 操作步骤 8.1 项目基本参数：参见生化检验日立7060生化分析仪项目测定参数.SOP文件 8.2 仪器操作步骤：参见生化检验日立7060生化分析仪操作规程.SOP文件 9. 检验结果的判断与分析 10. 质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。 11. 计算方法：以罗氏复合校准品ALT校准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以U/L报告。 12. 参考值范围 [4] 女性 31U/L 男性 41U/L 13. 临床意义[1,2]：丙氨酸氨基转移酶（ALT）旧称谷丙转氨酶（GPT），天门冬氨酸氨基转移酶（AST）旧称谷草转氨酶（GOT）。它们是氨基转移酶类的典型代表。氨基转移酶催化氨基从氨基酸转移给?-酮酸的反应。ALT是肝脏的特异性酶，仅在肝胆疾病时显著升高。而AST水平的升高和心肌或骨骼肌损伤，以及肝组织损害等都有关。因此同时进行ALT和AST的检测，可用于鉴别肝损伤和心肌或骨骼肌损伤。AST/ALT比率用于肝病的鉴别诊断。比率1预示中度的肝损伤；比率1和严重肝病有关，常见慢性肝病。 14. 线性范围 4～800U/L 15. 超出范围结果处理 本法对ALT活力检测的最大