db33t6012006蜂产品中氟胺氰菊酯残留量测定方法.docVIP

DB××/T ××××—×××× PAGE PAGE 1 浙江省质量技术监督局发布2006-03-08实施 浙江省质量技术监督局发布 2006-03-08实施 2006-02-07发布 蜂产品中氟胺氰菊酯残留量测定方法 Method for determination of fluvalinate residues in bee products DB33/T 601—2006 DB33 浙江省地方标准 ICS 67.050 X 04 备案号： DB33/T 601—2006 PAGE I 前 言 本标准由浙江省质量技术监督局提出并归口。 本标准起草单位：农业部农产品质量监督检验测试中心（杭州）、浙江省标准化研究院。 本标准主要起草人：朱亚红、王小骊、胡秀卿、吴珉、董秀金、李宁。 PAGE 3 蜂产品中氟胺氰菊酯残留量测定 1 范围 本标准规定了蜂产品（蜂蜜、蜂王浆、蜂花粉）中氟胺氰菊酯残留量的高效液相色谱测定方法。 本标准适用于蜂产品中氟胺氰菊酯的残留量测定。 本方法检出限为0.01 mg/kg。 2 原理 蜂产品中氟胺氰菊酯经丙酮与石油醚混合溶剂提取，提取液经氯化钠水溶液盐析，中性氧化铝层析净化，高效液相色谱仪紫外检测器分析，根据保留时间定性，外标法定量。 3 试剂与材料 除非另有说明，在分析中均为分析纯试剂和GB/T 6682中规定的至少二级的水。 3.1 丙酮。 3.2 二氯甲烷。 3.3氯化钠水溶液：称取10g氯化钠加入1000mL容量瓶中，用水定容至刻度。 3.4无水硫酸钠：350 ℃灼烧2 h，冷却后置干燥器备用（0℃-4℃密封保存三个月）。 3.5 石油醚：沸程 60℃-90℃。 3.6 甲醇。 3.7 甲醇：色谱级。 3.8中性氧化铝：80目-100目 150℃ 3.9 氢氧化钠。 3.10氟胺氰菊酯标准溶液(国家标准物质)：100 mg/L。 3.11使用时用甲醇稀释成线性范围浓度：0.05 mg/L -1.00mg/L。 3.12 玻璃层析柱：1cm×15cm。 4 仪器 4.1旋转蒸发器。 4.2高速匀浆机：40000 r/min。 4.3高效液相色谱仪：带紫外检测器。 5 样品制备 蜂蜜、蜂王浆取样后直接放入具塞塑料瓶，蜂花粉捣碎机磨碎后放入封口塑料袋，试样放入冰箱（0℃-4℃）贮藏备用。 分析步骤 6.1 提取 称取试样10.0g，放入250mL平底三角烧瓶。加5mL蒸馏水和80mL丙酮(3.1)＋石油醚(3.5)（1：1）混合液在高速匀浆机上提取，时间2min-3min,平底三角烧瓶中静止分层，上清液倒入250mL分液漏斗，底层再加入5mL蒸馏水和以上混合液50mL，继续在高速匀浆机上提取1min，平底三角瓶静止分层，上清液合并入分液漏斗。加入10％氯化钠水溶液50mL进行液－液分配。水相倒入另一分液漏斗，再用30mL、30 mL石油醚(3.5)反萃取两次，合并石油醚液，石油醚液过无水硫酸钠，在40℃下浓缩至1mL 6.2 净化 取玻璃层析柱（3.12），上下两端加2cm无水硫酸钠，中间加4g中性氧化铝（加5％水脱活）。用30mL石油醚预淋，弃去。上述浓缩样品用50mL石油醚＋乙酸乙酯（95：5）分多次溶解后移入层析柱淋洗，收集淋洗液，在40℃下浓缩至1mL-2mL，再用氮气吹干，用甲醇(3.6)溶解，倒入10.0mL刻度细管至刻度，待进样。 6.3 液相色谱条件 6.3.1色谱柱:C18 ODS, 4.0mm×250mm，5μm。 6.3.2流动相:甲醇＋水（90:10），流速：1.0mL/min。 6.3.3吸收波长:254nm。 6.3.4 柱温:室温。 6.3.6 色谱测定 分别吸取20μL标准溶液和试样溶液，注入液相色谱仪，以保留时间定性，根据试样蜂高或蜂面积，确定氟胺氰菊酯的标准工作液浓度，使响应值在仪器的检测线性范围内，进行外标法定量。 6.4 空白试验 除不加试样外, 均按上述步骤进行。 7 结果计算 试样中氟胺氰菊酯含量用质量分数w 计，单位以毫克每千克(mg/kg)表示，按公式（1）计算。 A1×V1×V3×? w ＝ …………………………（1） A2×V2×V4×m 式中： w－蔬菜、水果中氟胺氰菊酯（质量分数计）含量（mg/kg）； ?－标准溶液中氟胺氰菊酯质量浓度，单位为毫克每升（mg/L）； A1－试样中组分的峰面积或峰高，积分单位； A2－标准样中组分的峰面积或峰高，积分单位； V1－试样中提取的总体积，单位为毫升（m L）； V2—净化用提取液的总体积，单位为毫升（m L）； V3—浓缩后甲醇定容体积，单位为毫升（m L）； V4—进样