牛奶消化前后外泌体的变化及其对细胞增殖的影响-同济大学学报.PDF

第３９卷第５期 同济大学学报 （医学版 ） Ｖｏｌ３９ Ｎｏ５ ２０１８年１０月 ＪＯＵＲＮＡＬ ＯＦ ＴＯＮＧＪＩ ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ（ＭＥＤＩＣＡＬ ＳＣＩＥＮＣＥ） Ｏｃｔ． ２０１８ ｄｏｉ：１０１６１１８／ｊ１００８ ０３９２２０１８０５００８ ·基础研究· 牛奶消化前后外泌体的变化及其对细胞增殖的影响 １ １ １ １ ２ 徐小艳 ，牟　 姝 ，史哲溪 ，王兰芳 ，李　 平 （１． 同济大学医学院，上海　 ２０００９２；２． 同济大学生命科学与技术学院，上海　 ２０００９２） 【摘要】 目的　 探究超速离心法获取牛奶外泌体的最适离心力，探讨牛奶外泌体在体外消化模型中的稳定性及消 化后的牛奶外泌体对大鼠肠隐窝上皮细胞ＩＥＣ⁃６增殖的影响。 方法　 用体外消化模型消化牛奶，不同离心力超速 离心分离牛奶外泌体，用Ｗｅｓｔｅｒｎ 印迹法、动态光散射、扫描电镜对消化前后获取的外泌体进行表征，ＣＣＫ８ 实验分 析外泌体对细胞增殖的影响。 结果　 牛奶消化后外泌体蛋白浓度明显降低，外泌体标记蛋白ＣＤ６３和ＣＤ９在消 化前后的分离产物中均为阳性。 消化后的外泌体粒径大于未消化组，且粒径随离心力的升高而降低。 扫描电镜 下观察，消化前后的牛奶外泌体形态差别不大。 用５０ μｇ／ ｍＬ 外泌体培养ＩＥＣ⁃６细胞，结果显示牛奶消化前后的 × 外泌体均对ＩＥＣ⁃６细胞的增殖有促进作用，消化后离心（１３０ ０００ ｇ）获得的外泌体对细胞增殖的促进作用较为 × 明显。 结论　 １３００００ ｇ是获取牛奶外泌体的最适离心力。 牛奶消化前后的外泌体在标记蛋白、形态上相似，表明 牛奶中的外泌体能耐受体外消化模型的消化，牛奶消化后的外泌体仍能促进ＩＥＣ⁃６细胞的增殖。 【关键词】外泌体；体外消化模型；超速离心；细胞增殖 【中图分类号】 【文献标志码】 【文章编号】 Ｒ１５１２　 Ａ　 １００８ ０３９２（２０１８）０５ ００３９ ０５ Ｓｔａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ｍｉｌｋ ｅｘｏｓｏｍｅ ａｆｔｅｒ ｄｉｇｅｓｔｉｏｎ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ａｎｄ ｉｔｓ ｅｆｆｅｃｔ ｏｎ ｃｅｌｌ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ １ １ １ ２ ＸＵＸｉａｏ⁃ｙａｎ，ＭＵＳｈｕ ，ＳＨＩ Ｚｈｅ⁃ｘｉ ，ＷＡＮＧＬａｎ⁃ｆａｎｇ ，ＬＩ Ｐｉｎｇ （１． Ｔｏｎｇｊｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｓｈａｎｇｈａｉ ２０００９２，Ｃｈｉｎａ； ２． Ｔｏｎｇｊｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ ２０００９２，Ｃｈｉｎａ） 【Ａｂｓｔｒａｃｔ】Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　 Ｔｏ ｅｘｐｌｏｒｅ ｔｈｅ ｓｔａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ｂｏｖｉｎｅ ｍｉｌｋ ｅｘｏｓｏｍｅｓ ａｆｔｅｒ ｄｉｇｅｓｔｉｏｎ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｎ ｃｅｌｌ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ． Ｍｅｔｈｏｄｓ　 Ｂｏｖｉｎｅ ｍｉｌｋ ｅｘｏｓｏｍｅｓ