我国艾滋病患者应用二线抗病毒治疗方案后治疗效果和耐药性-研究.pdf

·中文论著摘要· 我国艾滋病患者应用二线抗病毒治疗方案后 治疗效果和耐药性研究 目 的 Immune 艾滋病(AcquiredDeficiency Syndrome，AIDS)是由艾滋病病毒 (Human Virus，HIV)引起的一种传染病，尚无法治愈。高效抗 lmmunodeficiency activeantiretroviral 逆转录病毒治疗(hi曲ly 病最有效的方法。但HIV的高变异特性和抗逆转录病毒药物的选择压力导致HIV而J‘ 药迅速产生，并成为影响抗病毒治疗效果的最主要原囚。欧美发达国家接受抗病 毒治疗患者的HIV耐药率已超过60％。我国于2003年开始施行大规模免费抗病毒治 治疗的广泛丌展，艾滋病患者生存时间显著延长，生存质量明显改善，死亡率．湿 著下降。F1益升高的耐药率使现有的免费抗病毒治疗效果+F降，更换二线抗病毒 治疗方案已成为当务之急。国外有研究报道更换治疗方案前检测到大量耐药变异， 但在更换二线抗病毒方案后，不同地区研究观测的治疗效果并不一致。而我国目 前也缺少关于更换治疗方案后系统的疗效观察和耐药研究。 随着我国免费抗病毒治疗的广泛开展和治疗时间的不断延长，耐药率逐年增 高，更换二线抗病毒治疗方案后其治疗效果如何?一线方案治疗失败后耐药变异 的累积是否会影响二线抗病毒治疗方案的效果?随着二线治疗方案的应用，是否 会很快出现新的耐药变异?为回答上述问题，‘本研究对我国河南省尉氏县更换二 线方案治疗的艾滋病患者进行了前瞻性队列随访研究。 方 法 ’ 1、研究对象 ． 参照2007版《国家免费义滋病抗病毒药物治疗手册》中艾滋病病人二线方案 入选标准，在我国河南省尉氏县于2009年8月招募89例艾滋病患者，其中65例 病人符合二线方案入选标准，另外24例病人不符合二线方案入选标并t，但病人 自愿JJ【l入队列应用■线方案进行抗病毒治疗，所有患者均签署了知情同意书。二 匹那韦+利托那韦(克立芝，LPV／r)，经治疗6个月、12个月后分别进行随访调 查，并进行CD4、病毒载量及耐药检测。 2、CD4+T淋巴细胞测定 CD4／CD8／CD3 20l-tl MMLTISET 室温避光15min，加入免洗溶血素450pl，室温避光15rain，用FACS 值等。 3、病毒载量测定 以lml血浆采用Roche公司COBAS AmpliPrep／COBASTaqMan自动载鼙仪 检测病毒载量。 4、病毒核酸提取 以抗凝140pl ViralRNAMiniKit JfJL浆提耿病毒基因组RNA，。按照QIAamp 说明书步骤提取RNA，提取物溶于60pl洗脱液中。 5、巢氏聚合酶链反应(nest．PCR) 2028．2050)和RT2 7：HXB2 3509—3539) 和 3509．3539)，用于扩增HIVol pol序列。 6、序列分析 经PCR扩增和测序得到HIV．1 pol基因的基因序列片段，然后用Contig．软件进行 拼接，用BioEdit软件进行序列比对。用MEGA 4软件的进行系统树分析，登录美 况和耐药性分析。 2 7、统计学分析 用SPSSl5统计软件进行统计分析