临床生化检验方法与试剂盒评价 课件.ppt

第*页 系统误差 误差分类 评价试验 评价指标 理想结果 比例系统误差 回收试验 Ea 1/2TEa 恒定系统误差 干扰试验 干扰值 1/2TEa 比例系统误差 方法对比试验 Y=a+bX Xc-Yc ± 1/2TEa 随机误差 重复性试验 （批内、批间、日间）、总不精密度 总随机误差 1/3TEa 四 方法学性能判断 第*页 临床生化试剂盒的质量标准 一 二 三 第三节 临床生化检验试剂盒的性能评价 临床生化检验试剂盒的分类 临床生化试剂盒的性能指标及评价 临床生化试剂盒的发展趋势 四 第*页 体外诊断试剂 体外诊断试剂（in vitro diagnosis regengts）用于完成一个特定体外诊断检验，而包装在一起的一组组分。试剂盒组分可包括抗体、酶、缓冲液、稀释液、校准物、控制物或其它物品和材料。 医疗器械是指：单独或者组合使用于人体的仪器、设备、器具、材料或者其他物品。其使用目的是： 疾病的预防、诊断、治疗、监护。 第*页 一 临床生化试剂盒的质量标准 《临床化学体外诊断试剂（盒）通用技术要求》2006 《临床化学体外诊断试剂(盒)产品技术审评规范》2011 第*页 单液体型 液体双试剂 二 临床生化试剂盒的分类 单液体型特别适用于半自动生化分析仪和小型自动生化分析仪。 稳定性较差 1.稳定性能好 2.可消除样品自身空白 3.提高抗干扰能力 4．预反应 多项同测组合试剂 浓缩试剂 第*页 1.试剂空白吸光度 2.试剂空白变化速率 3.分析灵敏度 4.线性范围 5.重复性 7.稳定性 8.临床试验 三 试剂盒性能指标和评价 试剂盒 6.准确度 第*页 （一）试剂空白吸光度 用蒸馏水做空白，用指定的空白液加入试剂作为样品测试，在测试主波长下，记录测试启动时的吸光度（A1）和约5分钟后的吸光度（A2），A2测试结果即为试剂空白吸光度测定值。 是判定试剂质量的一个有效指标 1.双缩脲法测定总蛋白 2.BCG法测定清蛋白 3.改良赖氏法测定ALT 4.NADH底物 5.色素原底物 第*页 （二）试剂空白变化速率 对于速率法试剂盒，用指定的空白液加入试剂作为样品测试时，在测试主波长下，记录测试启动时的吸光度（A1）和约5分钟(T)后的吸光度（A2），计算试剂空白吸光度变化率（?A/min）。 测定试剂空白吸光度变化（ΔA/min），用来检查试剂在工作状态下的稳定性。但事实上，试剂空白吸光度变化速率无法反映试剂盒的稳定性，试剂空白吸光度变化速率主要反映干扰程度和仪器的稳定性。 第*页 （三）分析灵敏度 用吸光度差值（ΔA）或吸光度变化（ΔA/min）来表示单位浓度的被测物反应所引起的信号变化，其含义类似摩尔消光系数。 分析灵敏度不是越高越好，以适合待测物检测范围为原则。 分析灵敏度一般用于批间比较，较能反映制造商的配方、原料的一致性。 第*页 （四）线性范围 取高浓度样品和低浓度样品按不同比例混合成5个浓度做线性试验。 试剂（盒）的线性范围越宽，临床复测几率越小，但与样品/试剂比例成反比 第*页 （五）重复性 1.批内重复性 在重复性条件下，用高、中、低三个水平浓度（高、低浓度应超过参考区间20%～30%，中浓度水平在参考区间之内）的控制血清或新鲜人血清测试试剂，重复测试至少10次。 2.批间重复性 用质量控制血清测试3×3（3个批号，每个批号取3瓶）批间差，较能反映制造商的配方、原料的一致性。干粉或冻干试剂还需测定批内瓶间差，测定同一批号的试剂20瓶，用变异系数（CV）来表示。 第*页 （六）准确度 1.相对偏差 直接用试剂盒测定参考物质（平行3次），评价测定均值与靶值的偏离程度。也可用由参考方法定值的高、中、低三个浓度的人混合血清，用试剂盒平行测定3次，计算均值与定值的相对偏差。 2.比对试验 既无参考物质、参考血清，也无标准品，也可用比对试验来验证准确度。 第*页 （七）稳定性 1.效期稳定性 取已到效期的试剂盒按以上评价方法对试剂盒性能指标进行评价。可作为审批的依据，但对该批次的试剂盒的稳定性意义不大。 2.热稳定性试验 对同批次试剂盒稳定性目前没有很好的评价方法。生化试剂盒一般置2-8℃保存，为了快速有效地评价试剂盒的稳定性，可以用加速试验来估计。 3.开瓶稳定性 也称在仓稳定性，是指试剂盒置分析仪试剂仓在使用过程中的稳定性。 第*页 （四）临床试验 1.要有临床机构伦理委员会确认的文件；2．在两家省级医疗卫生单位完成临床研究； 3．新诊断试剂（盒