应用生物技术（第六部分）.pptVIP

为了提高工程菌培养中质粒的稳定性，工程菌的培养一般采用二段培养法， 第一阶段先使菌体生长至一定密度。 第二阶段诱导外源基因的表达。 由于第一阶段外源基因未表达，从而减少了重组菌与质粒丢失菌的比生长速率的差别，增加了质粒的稳定性。在培养基中加入选择性物质如抗生素等，来抑制质粒丢失菌的生长，也是工程菌培养中提高质粒稳定性的常用方法。 六、基因工程药物的质量控制 基因工程药物与传统的一般药品的生产有着许多不同之处，从原料到产品以及制备全过程的每一步都必须严格控制条件和鉴定质量，确保产品符合质量标准、安全有效。 基因工程药物的质量控制主要包括： ①原材料质量控制； ②培养过程的质量控制； ③纯化工艺过程的质量控制； ④产品的质量控制； ⑤产品的保存。 七、基因工程药物制造实例 （一）基因工程菌的组建 干扰素（ＩＦＮ）是人体细胞分泌的一种活性蛋白质，具有广泛的抗病毒、抗肿瘤和免疫调节活性，是人体防御系统的组成部分。根据其分子结构和抗原性的差异分为ａ、β、γ、ω等４个类型。早期的干扰素是用病毒诱导人体白血球或白细胞产生的，其产量低、价格昂贵、不能满足需要。现在可以利用基因工程技术并在大肠杆菌中发酵、表达来进行生产。 在干扰素重组ＤＮＡ成功以前，人们对于干扰素的结构一无所知，因而不可能人工合成基因。在人染色体上的干扰素基因拷贝数极少（大约只有1.5％），加工上又有技术困难，所以不能直接分离干扰素基因，而是通过分离干扰素ｍＲＮＡ，再以干扰素ｍＲＮＡ为模板，通过反转录酶等使其形成干扰素ｃＤＮＡ。 干扰素ｃＤＮＡ的获得是将产生干扰素的白细胞的ｍＲＮＡ分级分离，然后将不同部分的ｍＲＮＡ注入蟾蜍的卵母细胞，并测m定合成干扰素抗病毒活性。结构发现１２ｓｍＲＮＡ的活性最高，因而用这部分ｍＲＮＡ合成ｃＤＮＡ克隆到含有lacZ和氨苄青霉素抗性基因的质粒PUC-T之中，转化大肠杆菌Ｋ１２。 * 应 用 生 物 技 术Applied Biotechnology 长江大学生命科学学院 第六部分 医学生物技术及人类基因组计划 第11章 生物技术制药 第12章 单克隆抗体和抗体工程 第13章 现代分子诊断技术 第14章 预防性及治疗性疫苗 第15章 人类基因的克隆 第16章 人类疾病的基因治疗 第17章 现代生物的规则与专利 第11章 生物技术制药 第一节　生物技术制药概述 第二节　基因工程制药 第三节　微生物发酵制药 第四节　我国生物技术制药的现状 ２１世纪初，在生物技术应用领域中，最具代表性的是生物医药，它的利润率可达17.6％，是信息产业的２倍。其巨大的经济利益来源于创新。其中包括开发新药品资源、改善医疗手段，从而提高整个医疗水平。 第一节　生物技术制药概述 以现代生物技术的手段会逐渐满足人们对各种生物药品的需求，传统药物的种种弊端希望通过发展生物制药技术得到有效地解决。现在像艾滋病、乙肝、癌症等多种不治或难治的疾病的防治主要依赖于生物药物。生物药物就是通过生物技术制药获得的。下面主要介绍生物药物的来源、特性和类型。 一、生物药物的来源 １．生物药物的定义 生物药物是指运用生物学、医学、生物化学等的研究成果，在生物体、生物组织、细胞、体液中，综合利用物理学、化学、生物化学、生物技术和药学等学科的原理和方法制造的一类用于预防、治疗和诊断的药品。 ２．生物药物的原料来源 生物药物的原料以天然的生物材料为主，包括人体、动物、植物、微生物和各种海洋生物等。中医很早就有“医食同源，药食同性”的说法。很久以来，许多植物和动物的组织及器官被用作药物。化学合成的许多药物首先是从动、植物体的发现开始的，如水杨酸（阿斯匹林）、维生素Ａ、乳酸、维生素Ｂ１２。 由于需求量的升高及其化学的合成比较廉价，转而由化学法生产。但有些药物，如多种生物碱，至今仍然要从植物体内分离。随着生物技术的发展，有目的人工制得的生物原料成为当前生物制药原料的重要来源，如用免疫法制得的动物原料、用基因工程技术制得的微生物或其他细胞原料等。 二、生物药物的特性 １．药理学特性 （１）治疗的针对性强：治疗的生理、生化机制合理，疗效可靠。例如，细胞色素ｃ为呼吸链的一个重要成员，用它治疗因组织缺氧所引起的一系列疾病，效果显著。 （２）药理活性高：生物药物是从大量原料中精制出来的高活性物质，因而具有高效的药理活性。例如，注射纯的ＡＴＰ可以直接供给机体能量，效果确切、显著。 （３）毒副作用小，营养价值高：生物药物主要有蛋白质、核酸、糖类、脂类等。这些物质的基本组成单位为氨基酸、核苷酸、单糖、脂肪酸等，对人体不仅无害而且还是重要的营养物质。 （４）生理副作用常有发生：生物药物是从生物原