己酮可可碱对人食管癌EC9706细胞裸鼠移植瘤生长的影响-病理学与病理生理学专业论文.docxVIP

州州ma，州州 州州ma， 州州州吨 。 阳唰唰唰41· 恻唰a唰dw 刷刷刷句 。 恻川川au 恻唰川州AE， 州州Y 原创性声明 本人郑熏声明:所里交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研 究所取得的成果。除文中巳经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人 或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出霆要贡献的个人和集 体，均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。 学位论文作者: 日期: 年 月 日 学位论文使用授权声明 本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品，知识产权阳属郑州大学。 根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部 门成机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅:本人授权郑州 大学可以将本学位论文的全部成部分编入有关数据库进行检索，可以来用影印、 缩印或者其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学 位论文戚与该学位论文直接相关的学术论文或成果时，第一署名单位仍然为郑 州大学。保宿论文在解密后应遵守此规定。 学位论文作者: 日期: 年月日 摘要 摘要 食管癌是世界上十种常见的恶性肿瘤之一，发病率和死亡率都很高。在我 国食管癌死亡率居惑性肿瘤第四位，其发病机制尚不完全明了。核转录因子，而 (nuclear 衍anscription factor-1d3， NF-1d3) ，是一种重要的转录调节因子， NF-1d3 家族由 Rel 蛋白家族中的成员以问源或异源二聚体的形式存在，其中发挥主要生 理功能的是 p50 与 p65 组成的异源二聚体， p50 是与 DNA 结合的部位， p65 参 与基因转录的起始调节，并促进 p50 与 DNA 结合。研究表明，核转录因子 NF麟1d3 信号通路与肿瘤的发生发展有着密切联系，有可能成为肿瘤治疗新的靶点。己 酣可可碱( pentoxifylline，PTX) ，申基黄嘿岭衍生物，是一种非选择性磷酸工酶 酶抑制剂，可以抑制 11d3a 的磷酸化及其降解，从而下调 NF-峭的活性，并且可 以抑制 NF-1d3调控的下游靶基因的表达，进而抑制肿瘤细胞的增殖。 本实验在体外实验的基础上首先构建人食管癌 EC9706 细胞裸鼠移植瘤模 型:将对照组、 PTX 处理组、 5-Fu 处理组、 P1χ 与 5-Fu 联合处理组处理 72h 后 的 EC9706 细胞分别注入各组裸鼠体内，通过观察肿瘤生长情况以及测量肿瘤体 积，从而了解各处理组对裸鼠食管癌移植瘤生长的影响。在此基础上，获取瘤 组织，采用免疫组化 SP 法检测 NF-1d3p65 、COX-2 、VEGF 和 ki67 蛋白的表达 情况:采用原位杂交技术检测 NF-而p65 mRNA 的表达情况，探讨 PTX 影响食 管癌裸鼠移植瘤生长的机制，为|临床使用 PTX 泊疗食管癌提供理论依据。 方法: /:1.各处理组作用巳C9706 细胞 72h 后，收集肿瘤细胞，调整细胞悬液浓度 至 4XI07 时，与裸鼠左腋下注射细胞悬液 O. lml 建立人食管癌裸鼠皮下移植瘤 动物模型。 /: 2. 观察各组肿瘤生长情况，测量肿瘤体积，绘制肿瘤生长曲线。 3. 采用免疫组化 SP 法检测 NF-1C8p65、COX-2 、VEGF 和 ki67 蛋白的表 达，运用原位杂交技术检测 NF-KBp65mRNA 的表达。 4. 统计学处理:所有数据均经 SPSS13.0 软件进行统计分析。计量资料采 用 t 检验或方差分析，检验水准0.=0.050 结果: 1.各处理组对人食管癌 EC9706 细胞裸鼠移植瘤的生长均有影响，空白对 摘要 照组瘤体体积为 2008.00 士 105.11 mm飞 PTX 处理组瘤体体积为 1599.60士 186.32 m3: 任Fu 处理组瘤体体积为 1280.20士473. 18 mm飞阿X+5-Fu 联合处理组瘤体 体积为 589.20 土 151.45 阳气组与组之间比较，差异均具有统计学意义(尺 0.05)0 2. 绘制肿瘤生长曲线，问X 处理组、 5-Fu 处理组、 PTX+5-Fu 联合处理组 裸腻移植瘤生长均比空白对照组生长缓慢。 3. NF-KBp65 蛋白夜空白对照组、问X 处理组、 5-Fu 处理组、 PTX+5-Fu 联 合处理组的阳性表达: 46.80 士 3.11、36.60 土 3.65、26.40 土 3.44、19.60土1.82， 组与组之间比较，差异具有统计学意义(只 0.01)。 4. NF-KBp65mRNA 在空白对照组、 PTX 处理组、 5-Fu 处理组、 PTX+5-Fu 联合处理组中的阳性表达: 39.20 土 5.17