己酮可可碱对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用及其机制的研究-内科学(肾脏病)专业论文.docxVIP

新江大学硕士论文 新江大学硕士论文 已酮可可碱对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用及其机制的研究 己酮可可碱对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护 作用及其机制的研究(中文摘要) 浙江大学医学院 内科学(肾脏病) 2001级硕士研究生 杨向红 导 师 陈江华教授 引言 七十年代末，Glanmana首次发现肾缺血后再灌注，肾损伤未能象预期的那样 好转，反而更加严重，据此提出肾缺血再灌注损伤(ischemia reperfusion injury,IRI)。 肾脏为高灌注器官．对缺血及缺血后再灌注均较敏感。肾IRI在幅床上很多见，常 见于肾移植、肾血管手术、体外碎石、休克复苏等情况。肾IRI是缺血性急性肾功 能衰竭的重要损伤环节，而且肾IRj赏导致移植物延迟复功(delayed graft function， DGF)，MHC—I类、MHC．II类抗原表达上调，从而加重免疫排斥反应，严重时导 致移植物丧失功能。 肾IRI的发生、发展过程非常复杂，近年来随着分子生物学的飞速发展，对 肾IRI及修复机理研究不断深入，人们对肾IRI的发病机制有了更深的认识。主 要认为肾IRI与嘌呤池耗竭，活性氧的作用，细胞内钙超载，各种炎症细胞、细胞 因子、细胞粘附分子共同作用引发的炎症级联反应，细胞凋亡，一氧化氮、内皮 素等密切相关。 浙江大学硕士论文 浙江大学硕士论文 已酮可可碱对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用及其机制的研究 因此真正了解肾IRI的发病机制及寻找一种有效的治疗药物来预防肾IRI，显 的非常重要。 己酮可可碱(Pentoxifylline，PTX)，即1一(5-氧化己基)一3，7二甲基黄嘌呤可 可碱，是甲基黄嘌呤的衍生物，具有类似可可碱、咖啡因和茶碱的特性，是一种 非选择性磷酸二酯酶抑制剂。以往常利用其扩张血管、抑制血小板聚集，改善血 液流变学的作用用于外周血管、心脑血管疾病的治疗。近年来随着分子生物学的 进一步发展．对其药理作用有了更深的了解，认为PTX在抑制炎症介质、免疫调 节、抑制氧自由基释放，抑制粘附分子的表达，抑制中性粒细胞活化、浸润等方 面有广泛作用，而被应用于治疗急性肺损伤、增殖性肾小球肾炎、糖尿病肾病、 肾小管间质纤维化、男子不育、变态反应性疾病等，同时PTX还加强糖皮质激素 和环孢素等免疫抑制剂的抗炎抗免疫作用，并减轻环孢素的肾毒性而应用于器官 移植。 近来国内外对PTX对心肌、大脑IRI的作用报道较多，但对其在肾脏IRI的 作用研究较少，仅有的研究中大部分认为PTX对肾脏有保护作用，有个别研究表 明PTX对肾脏无明显保护作用。但至今对PTX在肾IRI中的具体保护机制尚不明 确。现有研究主要着重于PTX对缺血再灌注时氧自由基、细胞因子的影响，认为 PTX能降低一些炎性细胞因子如肿瘤坏死因子(TNF．o)、白介素1 B(IL—l B)、 白介素6(IL。6)、白介素8(IL．8)的表达而达到保护作用。Hammer报道PTX能 通过降低黄嘌呤氧化酶／黄瞟呤脱氢酶比例，增加谷胱甘肽来改善肠IRI时的脂质 过氧化对组织造成的损伤。Maudi等体外实验发现多形核中性粒细胞(PMN)表 浙江大学硕士论文 浙江大学硕士论文 己酮可可碱对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用及其机制的研究 面表达细胞间粘附分子．1(ICAM．1)，PTX能抑制TNF—n介导的ICAM—l的表达 上调。同时体内实验发现健康志愿者服用PTX(2000mg／d)，连用2天，通过荧光 活化细胞计数分析表明PTX能明显抑制从上述健康志愿者体内抽取的外周静脉血 中分离出的单核细胞ICAM．1的产生，Northern blot分析法显示ICAM．1mRNA表 达下降。但国内外均未见有PTX对肾IRI时粘附分子影响的报道。 本课题拟通过建立大鼠的肾IRI模型，在缺血前半小时静脉注射PTX，再灌 注之后在不同的时间点监测肾功能和肾脏病理改变来观察PTX在大鼠肾IRI模型 中有无保护作用，同时通过测定再灌注之后在不同的时间点肾组织匀浆的MDA、 SOD活力、炎性细胞因子TNF—a、细胞粘附分子ICAM．1变化情况，来探讨PTX 发挥保护作用的分子机制。 实验方法 采用雄性健康成年Sprague-Dawley(SD)大鼠共75只，体重1 80．220克。采用 随机区组设计将动物随机分为3组：假手术组(SO组)、缺血再灌注组(IRI组)、 PTX治疗组(PTX组)，每组25只。建立大鼠的肾IRI模型(缺血时间为45分钟) 缺血前半小时予PTX 20mg／kg静脉注射，随后6mg／kg／h微泵维持。SO组和IRI 组予等