亲和性超顺磁性粒子于淀粉酶纯化之应用.DOCVIP

親和性超順磁性粒子於澱粉酶純化之應用 Application of affinity superparamagnetic particles in amylase purification 研究生：郭曉婷 Shau-Tin Kuo 指導教授：吳明昌 江啟銘 Ming-Chang Wu Chii-Ming Jiang 【摘要】 載體的開發一直為分離純化技術主要之研究方向，近年來磁性載體備受重視，例如以超順磁性粒子作載體，經交聯劑適當修飾後，應用於酵素固定化。本實驗則利用超順磁性粒子為載體，經環氧氯丙烷將界面官能基修飾後，使澱粉可順利裹覆至載體而製備出對澱粉酶具專一性之載體，應用於澱粉酶之分離純化。實驗結果顯示，可溶性澱粉有裹覆至磁性氧化鐵粒子上，沒有磁滯現象的現象，具有超順磁特性，並且將此親和性超順磁氧化鐵粒子應用於動物（台灣鯛魚腸、人類唾液）或植物（大豆）來源之澱粉酶，皆有良好的純化效果，其純化倍率分別為20.78、3.5和193.87倍，活性回收率分別為75.6、91.1和17.50%，於人類唾液中有2個異構澱粉酶，其分子量分別為55和69 kDa；魚腸之澱粉酶為66.1 kDa，而大豆澱粉酶為69.67 kDa。此親和性載體對於動物性澱粉酶單一步驟之純化效果較植物性純化佳。此外，本研究所開發之新磁性載體不僅成功地應用於澱粉酶純化上，同時具有快速分離、縮短操作時