家兔近视眼后巩膜加固术后不同时期成纤维细胞力学特性及CTGF表达的研究-眼科学专业论文.docxVIP

中文摘要 中文摘要 1 英文摘要 ．．4 研究论文家兔近视眼后巩膜加固术后不同时期成纤维细胞力学特性及 CTGF表达的研究 引言 “8 第一部分家兔近视眼后巩膜加固术后不同时期巩膜CTGF表达的研究 前言日Ij舌 ”一9 材料与方法 ·9 结果 14 附图 1 7 附表 一22 讨论 25 小结 27 参考文献 29 第二部分家兔近视眼后巩膜加固术后不同时期成纤维细胞力学特性的研 究 前言日lJ舌 303U 材料与方法 ·30 结果 32 附图 34 附表 ··36 讨论 38 ／J、结 40 参考文献 ··4l 综述结缔组织生长因子在眼科疾病中的研究进展 42 致谢 50 个人简历 51 成摘 成 摘 要 目的：明确后巩膜加固术后不同时期结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)表达的变化，并结合成纤维细胞力学特性的研 究，从组织．细胞．生物力学的角度进一步探讨后巩膜加固术的作用机制。 方法：3周龄新西兰家兔45只随机选取--I艮为实验眼(experimental eye)，用眼睑缝合方法制备近视动物模型，对侧为自身对照眼(阴性对照 组)。造模60天后，实验眼随机分为两组，A组(实验组)行后巩膜加固术 (posterior scleral Reinforcement，PSR)，B组(阳性对照组)行相似手术， 仅不放置加固条带。实验前后均检测每只家兔双眼屈光状态、眼轴长度， 分别于术后3月、6月取材。部分组织用组织块培养法培养巩膜加固区及过 渡组织的成纤维细胞，并传2代。用免疫细胞化学法对培养的细胞进行鉴 定，A组细胞分为A1组(3月巩膜组)、A2组(3月过渡区组)、A3组(6 月巩膜组)、A4组(6月过渡区组)，B组分为Bl组(3月巩膜组)、B3组(6 月巩膜组)，利用免疫细胞化学法对各组细胞CTGF进行半定量分析；部分 组织行组织学检测，对各组的CTGF的表达行半定量分析；利用细胞微管 吸吮的方法结合半无限体细胞力学模型(Half-space model)测定各组成纤 维细胞的力学特性(包括成纤维细胞的杨氏弹性模量和粘弹性参数)。结 果用SPSSl3．0统计软件进行统计分析。 结果： l家兔实验性近视的诱导结果 眼睑缝合前家兔双眼屈光度无明显差异，经过60天形觉剥夺诱导 后，实验眼与对照眼屈光度比较，诱导出(1．80a：1．37)D的相对近视，眼 轴相对延长了(O．45：￡-0．29)mm，差异有统计学意义(PO．05)。 2后巩膜加固术后的屈光度与眼轴长度 后巩膜加固术后3个月，A组与B组比较，两者屈光度与眼轴长度 之间均无统计学意义(Po．05)。后巩膜加固术后6个月，A组与B组比 较，眼轴相对变化了(O．59-1-0．35)mm，两者之间有统计学意义(Po．05)。 中文摘要3细胞培养及鉴定结果 中文摘要 3细胞培养及鉴定结果 家兔巩膜组织块培养4-6天，过渡区组织培养3．5天，周围开始有细 胞长出，2．3周融合，免疫细胞化学鉴定为成纤维细胞。 4组织学研究结果 光镜下实验眼巩膜胶原纤维排列紊乱，粗细不均，纤维间隙变大，纤 维走向不一，板层结构不清，胶原纤维部分或完全溶解，有纤维断裂现象， 而对照眼未见上述改变。 5不同时期巩膜组织CTGF的表达 CTGF的表达以细胞核及细胞浆为主，正常对照组的表达多呈淡黄 色，为+，实验组着色较深，多呈棕黄色，为卅。后巩膜加固术后3个 月、6个月，A组与B组比较，其着色程度均较高，差异均有统计学意义 (PO．05)。 6不同组织中成纤维细胞CTGF的表达 后巩膜加固术后3个月、6个月，A1组与B1组、A3组与B3组比较， 前者着色程度均较高，差异有统计学意义(Po．05)。A2组与A1组、A4 组与A3比较，前者着色程度均较高，差异有统计学意义(PO．05)。 A1组与A3组、A2组与A4组比较，两者之间均无统计学意义 (P0．05)。 7成纤维细胞力学特性及统计学分析 7．1后巩膜加固术后3个月、6个月，A组中巩膜成纤维细胞平衡杨氏模 量分别为E。=O．35 21+0．0853kPa、0．3612+0．121lkPa，B组的巩膜成纤维 细胞平衡杨氏模量分别为E。c=O．341 84-0．091 lkPa、0．34764-0．0821kPa，经 统计学分析，两组巩膜成纤维细胞在同一时间的平衡杨氏模量均无统计学 意义(PO．05)。 对成纤维细胞进行微管吸吮测试发现，在某一恒定负压作用下，成纤 维细胞表现出典型的粘弹性固体蠕变特征。A组巩膜成纤维细胞表观黏性 分别为g=2．87334-0．6154kPa．S、2．92824-0．6694 kPa．s，B组的巩膜成纤维细 胞表观黏性g=2．8 1 83 4-0．590 kPa．s