甲基强的松龙对脊髓损伤后卵磷脂胆固醇脂酰转移酶、甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶基因的表达影响-外科学(骨科学)专业论文.docxVIP

二O 二O O八年三月 学位论文原创性声明和版权使用授权书 学位论文原创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研 究工作所取得的真实成果。除文中已注明引用的内容外，本论文不含任何其他 个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本论文的研究做出重要贡献的个 人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由 本人承担。 作者签名。手写，：蜷 导师签名。手写，：j坦 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学 校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅 和借阅。本人授权福建医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关 数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论 文。 (保密的学位论文在解密后适用本授权书) 一签名 闷手 劭) 导师签名(手写)： 进竺卫一 ，年t6一婵轴 甲基强的松龙对脊髓损伤后卵磷脂胆固醇脂酰转移酶、甘氨酰脯氨 甲基强的松龙对脊髓损伤后卵磷脂胆固醇脂酰转移酶、甘氨酰脯氨 酸二肽氨基肽酶基因的表达影响 中文摘要 随着现代交通和工业的发展，脊髓损伤(spinal cord injury，sci)的发生也呈 逐年增加趋势。脊髓损伤除包括致伤因素造成的原发性损伤外，更重要的是损 伤后继发性病理生理改变所造成的继发性损伤。因此，如何减少或预防继发性 损伤进而促进损伤脊髓结构及功能的重建是基础研究的热点问题。 目前对继发性脊髓损伤中的一些分子和细胞的变化机制还未完全阐明。但 大量证据证明了，脊髓损伤早期产生的自由基及脂质过氧化反应即是继发病理 损害发生的主要因素。卵磷脂胆固醇脂酰转移酶可促进组织、细胞内胆固醇的 清除、维持细胞胆固醇稳态，在磷脂代谢中有重要的作用。 神经细胞损伤后，在局部可引起炎症反应，趋化因子吸引更多的炎症细胞 以及小胶质细胞、星形胶质细胞的激活和聚集。这有利于清除死亡组织及细胞 碎屑为神经再生创造条件；但同时由于活化的小胶质细胞、星形胶质细胞的增 多，导致过度胶质化，局部形成胶质瘢痕，成为轴突再生的一个机械屏障。甘 氨酸脯氨酸二肽氨基肽酶能特异地水解N．2末端为甘氨酰．脯氨酰的肽键，而胶 质瘢痕中恰恰富含这种结构成份，因此推测甘氨酸脯氨酸二肽氨基肽酶在胶原 肽的降解中起到作用。 人们对急性脊髓损伤的药物治疗进行了研究。经过大量临床研究表明，大 剂量甲基强的松龙疗法被作为是急性脊髓损伤的标准治疗方案。 本文对脊髓损伤早期后卵磷脂胆固醇脂酰转移酶和甘氨酸脯氨酸二肽氨基 肽酶2个基因的表达变化进行研究，并探讨早期应用甲基强的松龙对其基因表 达的影响。分为2个部分。 Spinal Spinal cord injury 摘要 第一部分 甲基强的松龙对脊髓损伤后LCAT基因表达的影响 目的研究甲基强的松龙对脊髓损伤后卵磷脂胆固醇脂酰转移酶基因表达 的影响。方法SD大鼠30只，体重200--250 g，雌雄不拘。随机分为假手术组、 单纯脊髓损伤组(损伤组)、脊髓损伤+大剂量甲基强的松龙组(甲基强的松龙组)。 每组10只。损伤后24小时将损伤平面上下0．5cm的脊髓组织切取，进行RT-PCR 反应。结果假手术组在术后24小时LCATmRNA的表达的相对丰度为 0．6743±0．0043，损伤组在伤后24小时LCATmRNA的表达的相对丰度降至 0．0589__．0．0281，差异有非常显著性(PO．01)。甲基强的松龙组在伤后24小时 LCATmRNA的表达的相对丰度为0．7036_+0．2225，与损伤组比较差异有显著性 (PO．01)。结论大剂量甲基强的松龙能促进LCAT的表达，发挥保护作用，减 少脊髓继发损伤。 第二部分脊髓损伤早期甘氨酸脯氨酸二肽氨基肽酶表达 及甲基强的松龙对其表达的影响 目的：研究脊髓损伤后甘氨酸脯氨酸二肽氨基肽酶的基因表达，并探讨甲基强的 松龙对其表达的影响。方法：SD大鼠30只。随机分为假手术组、单纯脊髓损伤 组(损伤组)、脊髓损伤+大剂量甲基强的松龙组(甲基强的松龙组)。应用改良的 Allen打击法致T8脊髓损伤。甲基强的松龙组大鼠尾静脉内注射大剂量甲基强的 松龙(30mg／kg)。损伤后24小时将损伤平面上下0．5cm的脊髓组织切取，进行 RT-PCR反应。检测甘氨酸脯氨酸二肽氨基肽酶的基因表达。结果：假手术组在 术后24小时甘氨酸脯氨酸二肽氨基肽酶mRNA的表达的相对丰度为 1．5809_+0．1554，损伤组在伤后24小时甘氨