脊髓痛觉可塑性的一氧化氮信号通路-神经生物学专业论文.docxVIP

缩略语及符号缩略语及符号 缩略语及符号 缩略语及符号 ADPRT ADP-dbosyltransfcrase BAPTA 1,2-Bis(2-aminophenoxy)ethane-N,N,N’．N-tetraacedc acid Bell benzamide DMEM Dulbec圮o’s Modified Eagle Medium D．NAM匣 Nw-Nitro-D-Arginme Methyl Ester DRG dorsal root ganglion EGTA ethyleneglyeolbis aminoethyl ethertetra-acetate HEPES n-2-hydroxyethylpiperazine-n’-2-ethanesulfonie acid L-NAME Nw-Nitro-L-Arginine Methyl Ester LTP long-term potentiation M[B methyl blue mM mmo儿 NADPH．d nieotinamide adesine dinueleotide phosphate-diaphorase NBT Nino．Tetrazolium Blue Chloride Nic hieotinamide NMDA N-methyl-D·aspartic acid NOS Ilitric oxide synthase ODQ 1H-[I，2,4]oxadiazolo[4，3一a]-quiloxalin一1-one sGC soluble guanylyl eyelase SNP sodium nitroprusside 8-Br-cGMP 8-Bromoguanosine-3’：5，-eyelic monopbosphate Sodium Salt uM I．unol／L 中文摘要中文摘要 中文摘要 中文摘要 外周伤害性刺激可诱发脊髓背角神经元反应的长时程增强(LTP)，考虑到 海马LTP与学习记忆的密切关系，脊髓LTP被认为是一种痛觉记忆机制。在炎 症性或神经病理性疼痛状态下，痛觉过敏产生的重要原因之一是由于脊髓背角痛 敏神经元持续过度兴奋，称为中枢敏化，它也是脊髓痛觉记忆的一种主要表现形 式。因此，伤害性刺激诱发脊髓背角神经元反应的LTP被认为是痛觉中枢敏化 的神经机制。近年来的研究表明，一氧化氮(NO)及其介导的不同信号途径参 与脊髓中枢敏化。然而，目前尚不清楚N0是否参与伤害性刺激诱发脊髓背角神 经元反应的LTP．本研究主要以强直刺激坐骨神经诱发脊髓背角场电位c反应 LTP为实验对象，观察NO及其下游靶标在脊髓LTP不同时相的作用，进一步 探讨脊髓背角神经元反应LTP与中枢敏化的关系，从而揭示痛觉过敏的脊髓机 制。 l、NO介导脊髓背角痛觉反应的可塑性变化 (1)，电生理学实验显示，在强直刺激坐骨神经前30min，脊髓表面给予 一氧化氮合酶(NOS)抑制剂L-NAME(ImM，20m)和NO结合剂血红蛋白 (2mg／ml，2091)均阻断脊髓背角场电位C反应LTP的产生。相同剂量的D-NAME (1mM。2091)对脊髓LTP的产生没有影响，排除了L-NAME非特异性药理作 用。而预先给予NOS的底物L型精氨酸(L．arginine；2raM，2C叫)可完全翻转 L．NAME的抑制作用，进一步说明NO参与脊髓背角场电位C反应LTP的形成。 (2)，行为学实验观察到，诱发脊髓背角场电位C反应LTP的强直刺激可 引起大鼠刺激侧的热痛觉过敏，辐射热敏感的后腿抬腿潜伏期由刺激前 9．83士0．62s降为刺激后6．51士0．88s，热痛敏维持6d。而对侧后腿抬腿潜伏期没有 明显的变化。在强直刺激坐骨神经前30min鞘内给予L-NAME(2mM，10tjl)则 阻断大鼠热痛觉过敏的产生，尽管相同剂量的L-NAME并不影响大鼠的基础热 痛觉反应。 (3)，应用NADPH．黄递酶组织化学反应显示，坐骨神经强直刺激后5min 同侧脊髓背角染色较对侧明显加深，提示大量NOS被活化。30rain后，刺激侧 脊髓背角阳性反应成分有所减弱，仍较对侧染色深。2h后基本恢复至对照水平， 刺激侧脊髓背角染色与对侧比较没有明显差异，提示此时NOS可能已恢复至静 息状态。 上述结果表明，NO参与脊髓背角场电位C反应和伤害性行为反应LTP的 形成，且作用主要发生在诱导阶段，为脊髓LTP是痛觉中枢敏化机制提供了电 生理和行为学证据。 2 脊髓痛觉可塑性的一氧化氪信号通路2、NO激活的不同信号通路在脊髓背角痛觉反应可塑性变化中的作用不同 脊髓痛觉可塑性的一氧化氪信号通路 2、NO激活的不同信号通路在脊髓背角痛觉反应可塑性变化中的作用不同 在神经系统，NO两个主要作用靶标分别是可溶性鸟