天然药物分离提化技术及结构特征.ppt

天然药物分离技术及结构表征 一、经典分离技术 二、色谱分离技术 三、大孔树脂分离技术 四、膜分离技术 五、分子蒸馏技术 中药经过各种方法提取后所得的提取液仍是包含诸多成分的混合物，需要进一步的分离精制和纯化处理，才能得到所需成分或单体化合物。但提取液一般体积较大，所含成分浓度较低，因此为了提高浓度，有利于分离精制，首先需要对提取液进行浓缩。 浓缩可通过蒸发或蒸馏来完成，所采用的方法视溶剂和有效成分的性质而定，具体的方法有常压蒸发、减压蒸馏、薄膜蒸发、反渗透法、超滤法等。 1.常压蒸馏法 适用于溶剂沸点低、有效成分受热不易分解的提取液的浓缩，如氯仿、乙醚、石油醚等的提取液。 操作注意事项：处理乙醚提取液时，需用电热板或没有明火的其他装置水浴加热，禁止用明火或电炉加热。 2.减压蒸馏法 适用于溶剂沸点高，有效成分受热易分解的提取液的浓缩。一般当溶剂沸点超过70℃时，在可能条件下应采用减压浓缩。 如果提取液浓缩到小体积放置后，有固体或结晶析出，可将析出物滤出，供进一步分离；滤液再浓缩，放置，再观察和处理，直到母液蒸干为止。 如含叶药材用70%乙醇提取，在回收乙醇至含醇量近15% -20%时，置于冰箱中，绝大部分叶绿素可沉淀出来。滤除后，可进一步浓缩至近稠膏状时，趁热转移至较小的圆底烧瓶内，水浴加热，直接减压抽气，使提取物发泡成干燥疏松状，待进一步处理。 总之，浓缩过程中应注意尽量避免不必要的损失，防止热敏性成分被破坏。浓缩后的提取液就可以根据中药成分的性质如溶解度、在两相溶剂中的分配比、分子大小、吸附性、解离程度等的差异选择恰当的方法进行进一步的分离和精制。 中药化学成分常规分离精制方法主要有系统溶剂分离法、两相溶剂萃取法、沉淀法、结晶法、盐析法、透析法、分馏法、升华法等。 系统溶剂分离技术 一、原理(根据物质在两相溶剂中的分配比不同进行分离) 天然药物提取液中常含有极性不同的各种化学成分，系统溶剂分离法就是根据它们在不同极性溶剂中溶解度的差异，选用3-4种不同极性的溶剂组成溶剂系统，由低极性到高极性分步对浓缩后的总提取物进行提取分离。 系统溶剂分离技术关键是依据“相似相溶”原理对溶剂的选择。 常用的溶剂与中药化学成分的对应关系 二、适用范围 此法是早年研究天然产物有效成分的一种最主要的方法，主要用于分离提纯含有极性不同的各种化学成分的中药提取液。目前仍是作为研究成分不明天然产物的最常用方法之一。但此法在微量成分、结构性质相似成分的分离纯化上受到很大限制。 三、优缺点 此法操作手续繁琐，对化学性质不稳定，容易引起分解、异构化的天然产物应特别注意。它对各类化学成分的分离操作往往都是凭经验摸索进行的。 两相溶剂萃取法 两相溶剂萃取法又称为“萃取法”，是在提取液中加入一种与其不相混溶的溶剂，充分振摇以增加相互接触的机会，使原提取液中的某种成分逐渐转溶到加入的溶剂中，而其他成分仍留在原提取液中，如此反复多次，将所需成分萃取出来的分离方法。 一、基本原理 二、各种萃取技术 （一）简单萃取法 仪器装置: 少量萃取一般在分液漏斗中进行；中量萃取可在较大的下口瓶中进行；工业生产中的大量萃取，多在密闭萃取缸内进行。 操作技术 （ 1）小量萃取操作过程 （ 2）萃取剂的选择 ①有机溶剂萃取剂: 如果从水提液中萃取亲脂性成分，一般选用苯、氯仿或乙醚等亲脂性有机溶剂；如果从水提液中萃取中等极性成分，一般选用乙酸乙酯、丁醇等弱亲脂性有机溶剂或在氯仿、乙醚中加入适量乙醇以增大其亲水性。 ②用于pH梯度萃取法的萃取剂 （3）萃取剂的用量 （4）水提液的浓度要求:其浓度最好在相对密度1.1-1.2之间，过稀则萃取剂用量太大，过浓则两相不易充分接触，影响萃取效率。 （5）乳化现象的处理 破坏乳化的方法有： ①较长时间放置； ②轻度乳化可用一金属丝在乳化层中搅动使之破坏； ③将乳化层抽滤； ④将乳化层加热或冷冻； ⑤分出乳化层（有时乳化层就是所需要的成分），再用新溶剂萃取； ⑥若因两种溶剂能部分互溶而发生乳化，可加入少量电解质（如氯化钠），利用盐析作用加以破坏，在两相相对密度相差很小时，也可加入食盐增加水相的密度； ⑦滴加数滴表面活性更强的低级醇类如乙醇、戊醇，把原来的表面活性物质顶替，达破乳目的。 （二）逆流连续萃取法 逆流连续萃取法是利用两种互不相溶的溶剂相对密度的不同，以相对密度小的溶剂相作为移动相（或分散相），相对密度大的溶剂相作为固定相（或连续相），使移动相逆流连续穿过固定相，借以交换溶质而达到分离的一种连续萃取技术。 1.仪器装置 2.操作技术 将相对密度小的溶剂相作为移动相置高位贮存器中，而相对密度大者则作为固