第六章动物实验的基本方法.ppt

第六章 动物实验的基本技术方法 一.动物实验前的准备 动物实验前的理论准备: 实验动物方面的基础知识;选题 ;方案的制订;方法的选定 动物实验前的条件准备: 实验仪器、药品、试剂、实验动物 预备实验 二 动物实验的设计与分组 原则： 对照性原则： 设对照组，应有可比性，分为自体对照和组间对照 一致性原则： 对照组和试验组除处理因素外，其他因素保持一致 重复性原则 同一处理要设多个样本例数，为估计试验误差、降低试验误差、增强代表性，提高实验结果的精确度 随机性原则： 随机分组 客观性原则 实验设计、选择观察指标以及结果判断要客观 三.实验动物的领取 明确实验所用动物的品种、品系、规格、等级、以及实验的大致时间表 填写动物申领计划表，教研室主任签字生效 填写动物领用表,确定所领动物的品种、品系、规格、数量 四.实验动物的抓取和固定 小鼠的抓取和固定 抓取方法 固定方法: 徒手固定;固定板固定;固定架固定;简易固定 大鼠的抓取与固定 抓取方法 固定方法: 徒手固定;固定板固定;卵圆钳固定 豚鼠的抓取与固定 抓取方法 固定方法 徒手固定 固定板固定 家兔的抓取与固定 抓取方法 固定方法 徒手固定;盒式固定;台式固定 犬的抓取与固定 抓取方法 固定方法 慢性试验中犬的固定方法 急性试验中犬的固定方法:头部的固定;四肢固定 猪的抓取与固定 抓取方法 固定方法 猴的抓取和固定 抓取方法 固定方法 五.动物的编号、标记及去毛方法 动物的编号与标记： 常用的标记液： ①3%~5%苦味酸溶液（黄色） ②0.5%中性红或碱性品红溶液（红色） ③2%硝酸银溶液（咖啡色，涂后需光照10分钟） ④煤焦油酒精溶液（黑色） 编号原则： 先左后右，从前到后。左前肢记为1号，左侧腹部为2号，左后肢3号，头顶部为4号，腰背部5号，尾基部6号，右前肢7号，右侧腹部8号，右后肢9号。编号超过10时，可使用两种不同颜色的溶液，把一种颜色作为个位数，另一种为十位数。 六. 实验动物被毛的去除方法 1.? 剪毛法 2.??拔毛法 3.? 剃毛法 4.??脱毛法 常用的化学药品：硫化钡（BaS）、硫化钠（NaS）、硫化钙（CaS） 七. 动物的麻醉方法 常用的麻醉剂 1.??挥发性麻醉剂:乙醚、氯仿等 2.?非挥发性麻醉剂：苯巴比妥钠、戊巴比妥钠、硫喷妥钠等巴比妥类的衍生物，盐酸氯胺酮、水合氯醛等 3.中药麻醉剂：洋金花、东莨菪碱等 其他麻醉辅助用试剂： 镇痛剂：芬太尼、埃托菲等 镇静剂：氟阿尼酮、乙酚丙嗪等 抗胆碱药：阿托品、格隆溴铵等 肌松剂：筒箭毒碱、泮库溴铵等 其它：α-2激动剂——美托咪定，对狗、猫、兔及大多数啮齿类动物可产生良好的镇静和镇痛效果 动物的麻醉方法 1．全身麻醉 ①吸入法: ②腹腔和静脉给药麻醉法 2.局部麻醉:盐酸普鲁卡因、盐酸可卡因、利多卡因 麻醉注意事项: ①静脉注射必须缓慢，同时观察肌肉紧张性、角膜反射和对皮肤夹捏的反应，当这些活动明显减弱或消失时，停止注射。 ②麻醉时要注意保温。保温方法有：实验桌内装灯，电褥，台灯照射等 ③作慢性实验时，在寒冷季节，麻醉剂在注射前应加热至动物体温水平。 ④注意保持动物的呼吸道的通畅，麻醉前禁食. 八.动物的给药途径和方法 实验动物的给药方法主要分为注射法和投入法两种，注射法又分为：皮下注射、肌肉注射、腹腔注射、脑膜下注射、脑内注射、胸腔内注射、腰椎内注射、静脉注射、关节腔注射和心内注射等方法，投入法可分为：鼻腔内投入、胃腔内投入、肠管内投入、气管内投入以及经口腔投入。 小鼠的给药途径和方法 灌胃（i.g）:动物要固定好；头颈部保持平展；要沿着口角进针，再顺着食管方向插入胃内；决不可进针不顺就硬向里插。 皮下注射（s.c）:常选用颈背部皮肤。 皮内注射（i.d）:观察皮肤血管的通透性变化及观察皮内反应，多用于接种、致敏实验等。雄性较雌性皮肤紧密，注射难度大。 肌肉注射（i.m）：较少应用 腹腔注射（i.p）: 静脉注射（i.v）：一般采用尾静脉注射。小鼠尾部背腹各有一根动脉，两侧各有一根静脉。 大鼠的给药途径和方法 灌胃:左手按徒手固定方式固定大鼠,使大鼠伸开两前肢,手掌握住大鼠背。方法与小鼠相同。 皮下注射：常选在左侧下腹部或后腿皮肤处，方法同小鼠。 皮内注射：常选用背部脊柱两侧的皮肤，方法同小鼠。 肌肉