人教版教学幻灯片基因工程课件(人教版高中生物选修3).pptVIP

基 因 工 程;设想一;▲“基因工程”技术;基因工程培育抗虫棉的简要过程：;什么叫基因工程？;基因工程的别名;DNA重组技术(基因工程)的 基本工具;前面介绍的利用基因工程培育抗虫棉的主要步骤有哪几个?;▲上述的三个步骤中各需要什么工具？;▲这三种工具的作用各是什么?;1. 限制性核酸内切酶——“分子手术刀”;A; 1.大肠杆菌(EcoRΙ)的一种限制酶能识别的脱氧核苷酸序列是(用碱基表示)_____________ ;切点在________之间。;▲限制性内切酶的特异性表现在: 特定的核苷酸序列-----是“回文序列”(?). 特定的切点.; 被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端.;限制酶;▲“黏性末端”和“平末端”;; 1. 要想获得某一个特定性状的基因(即”目的基因”)必须要用限制酶切几个切口？可产生几个黏性末端？;;▲你是否想过? 限制酶是否会切割自己细胞里的DNA呢?为什么?这对于其自身有意义吗?;▲DNA连接酶的种类(根据来源分)及其在功能上的异同. ----见课文P5.; 显然,若将上述两者的黏性末端黏合(连接)起来，就似乎可以合成新的DNA分子(重组DNA分子)了 ;2.DNA连接酶——“分子缝合针”; DNA连接酶可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来，即把梯子两边扶手的断口(注意位置)连接起来，这样一个重组的DNA分子就形成了.;; 异: DNA连接酶:是将几个DNA片段连接起来;不需DNA模板. DNA聚合酶:则是将脱氧核苷酸连接(聚合)成DNA;需以DNA的一条链为模板.; ----导入过程需要运输“目的基因”的工具——载体。;▲载体是什么(生物化学成分)?它从哪里获得?它是如何承载目的基因的?;3.基因进入受体细胞的载体---“分子运输车”. ;▲什么是质粒?; 最常用的质粒是大肠杆菌的质粒，其中常含有抗药基因，如四环素的标记基因。质粒的存在与否对宿主细胞生存没有决定性作用，但复制只能在宿主细胞内完成。;▲载体的作用有哪些？;▲作为载体必须具备哪些条件？;双基练习：;两个____之间的_____ . (3) DNA末端:限制酶切割DNA产生的DNA末端有两种形式:______和_______. 2. DNA连接酶----“分子缝合针” (1)作用:???复被限制酶切开的两个核苷酸之间的______. (2)种类: ①E.coli DNA连接酶:只能缝合DNA的_____ ②T4 DNA连接酶:既可缝合DNA的_____,又可缝合双链DNA的_______.; 3.基因进入受体细胞的载体----”分子运输车” (1)载体的种类 ①质粒:是一种裸露的,结构简单,独立于细菌染色体之外,并能够自我_____能力的双链______ DNA 分子;②______.③________. (2)载体的特点 ①能够在细胞内_______;②有一个或多个____切割位点,便于供源DNA的插入. ③具有_____基因,供重组DNA的鉴定和选择.;基因工程的基本操作程序;▲基因工程的基本操作流程;▲基因工程的基本操作程序主要包括 四个基本步骤：;;步骤一：目的基因的获取;▲获取目的基因的途径有哪些?;▲从基因文库中获取“目的基因”：;;▲利用PCR技术扩增“目的基因”.;▲提示与思考: 1.图中的“模板DNA”就是已知核苷酸序列的目的基因. 2.引物是人工合成的,与模板DNA(即目的基因)互补,作用是使___. 3.加热的作用是使_________. 4.聚合酶(Tap酶)是指____(选:DNA聚合酶;RNA聚合酶),其特点是_________. 5.原料是_________. 6.每扩增一次,目的基因的数目增加___. 7.“退火”;▲提示:PCR的基本操作(过程): PCR是一种反复循环的DNA合成反应过程,其基本反应有三个步骤： 1. 变性:通过加热(高温)使模板DNA完全变性成为单链,同时引物自身和引物之间存在的局部双链也得以消除. 2. 退火:将温度下降至适宜温度，使引物与模板DNA退火结合； 3. 延伸:将温度升高,热稳定DNA聚合酶(即耐高温)以dNTP(即脱氧核苷酸)为底物(即原料)催化合成DNA链延伸. 以上三步为一个循环，新合成的DNA分子又可以作为下一轮合成的模板，经多次循环后即可达到扩增DNA片段的目的.;▲提示:两个引物、一个模板.;▲人工合成目的基因;2.直接合成.; 在获取目的基因后,