中药化学成分的一般研究课件.ppt

2．分子式的测定 　目前最常用的是质谱法（MS）。高分辨质谱法（HR-MS）不仅可给出化合物的精确分子量，还可以直接给出化合物的分子式。 　如青蒿素的HR-MS中，分子离子峰为m/z282.1472,可计算出其分子式为C15H22O5（计算值282.1467）。也可通过质谱中出现的同位素峰的强度推定化合物的分子式。 有时化合物的分子离子峰不稳定，难以用HR-MS测出。需进行元素分析，确定元素种类，各元素在化合物中所占的百分含量，从而求出化合物的实验式，再用FD-MS，FAB-MS测其分子量，以求得到化合物的分子式。经典的分子量测定法：混合熔点降低法，衍生物推导法，酸碱测定法等，现已基本不用。 3．化合物得结构骨架与官能团的确定 　在决定了一个化合物的分子式后，就需要进行分子结构骨架和官能团的确定。 一般首先决定化合物的不饱和度 　　　Ω=1/2（2n4+n3-n1+2） 　通过各类中药化学成分的显色反应，色谱行为、酸碱性、溶解性等，结合文献调研及波谱等推定分子骨架和官能团。 　官能团的显色反应：如FeCL3试剂，可鉴定酚羟基存在，异羟月乌酸铁反应可鉴别内酯环等。需要注意的是在鉴别实验中需排除干扰，以求得到正确的判断。 1、硅胶： 呈微酸性，其吸附活性中心为硅醇基，是一种极性吸附剂 　 　骨架表面存在Si—OH。多，则吸附力强， 　　　　　　　　Si—OH吸水，则吸附力下降。 　　　　　　　　105-120。C可除水，重现活性。 　　　　　　　200。C，Si-OH ?硅氧烷基（去OH作用） 　　柱层：100~160目，200~300目 　　薄层：10~40μ，加压可用于柱层 　 硅胶根据是否加入粘合剂可分为硅胶G（以煅石膏为粘合剂的硅胶）和硅胶H（不含任何粘合剂的硅胶）； 根据加入的无机荧光剂的不同又分为硅胶GF254硅胶GF365等。 　　键合硅胶 不同的有机基团通过化学反应键合到硅胶表面。 非极性键合硅胶 极性键合硅胶 离子型键合硅胶 　a. 非极性键合硅胶（反相硅胶）：硅胶表面键合极性很小的烷基。 如： 十八烷基、辛烷基、苯基烷等 极性大的成分：吸附能力弱，先下 极性小的成分：吸附能力强，后下 　b. 极性键合硅胶：键合CN、NH3、双OH等 一般作正相层析 　c、离子型键合硅胶：键合各种离子交换基团 酸性基团：-SO3H、　-COOH、　-CH2COOH… 碱性基团：-CH2NH2、　-CH2N（CH3）3Cl… 二性基团：—CH（COOH）-CH2-CH2-NH2… 　　　　　—（CH2）3O-CH2-CH（OH）　-CH2-NH2… 2、氧化铝　　极性吸附剂 （ 1）组成 碱性氧化铝（pH 9） 中性氧化铝（pH 7.5） 酸性氧化铝（pH 2~3） 100~160目——柱层 200目柱层需加压 160~200目——软板TLC 200目——硬板TLC （2）活度： 含水量越少，吸附力越强，活度越小 　含水量（%） 0 3 6 10 15 　 活度（级） I II III IV V （3）、应用 　碱性氧化铝——分离生物碱和甾族化合物，不适于醛、酮、酯、有机酸 　中性氧化铝——分离中性、碱性亲脂性化合物，不适于酸性成分 　酸性氧化铝——分离有机酸类，不适于碱性成分 缺点：吸附力强，成分损失大 3.活性炭　 　　属非极性吸附剂（与Al203、SiO2相反） （1）类型 　　 粉状活性炭： 比表面积大，吸附力强，流速慢，层析需加压 颗粒状活性炭：比表面积小，吸附力弱，流速快，易于控制。常用 锦纶活性炭： 以锦纶为粘合剂，将粉状活性炭制成颗粒状 比表面积介于前二者之间，但吸附力最弱（∵加入锦纶，一方面减少比表面积，一方面锦纶与活性炭之间吸附） （2）分离范围 粉状活性炭——对活性炭吸附较弱物质（极性较大成分）， 　　　　　　　常拌入30~40%硅藻土，增加流速。 颗粒状活性炭——中等极性成分 锦纶活性炭——极性较小成分 主要用于柱层分离及色素和非极性杂质的吸附 　　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　溶质极性 吸附力三要素 溶剂极性 吸附剂活