活性污泥系统中四环素对其降解微生物抗性及群落结构的作用影响-环境工程专业论文.docxVIP

活性污泥系统中四环素对其降解微生物抗性及群落结构的作用影响 活性污泥系统中四环素对其降解微生物抗性及群落结构的作用影响 I I 活性污泥系统中四环素对其降解微生物抗性及群落 结构的作用影响 摘 要 近年来，随着四环素类抗生素使用量的不断增大，不仅增大了 四环素类抗生素的环境残留，还诱导了四环素类抗生素抗性基因 （TET-ARGs）的产生、传播以及抗性菌产生的风险，使得 TET- ARGs 成为当今人类健康面临的重大威胁之一。污水处理系统作为 环境中四环素类抗生素及其抗性基因的一个重要污染点源，已引起 广泛关注。研究城市生活污水处理厂中的四环素类抗生素去除和残 留情况，以及 TET-ARGs 和抗性菌污染的情况，弄清其产生、迁 移、演变的规律对于从污水处理系统入手集中预防和治理该类污染 具有重要的意义。 本研究以生活污水处理厂中常见的厌氧-好氧（A/O）工艺为 例，主要研究污水处理工程中四环素类抗生素的降解去除行为及影 响因素，及其对四环素对活性污泥中微生物抗性基因和抗药菌的诱 导和演变影响。以期为从污水处理系统着手有针对性的达到控制和 去除四环素类抗生素及其抗性基因污染提供方向和依据。 II II 本文的主要研究结论如下： （1）微量 TC 的加入对 A/O 系统的运行效能具有一定的作用影 响，当进水 TC 浓度为 500μg/L 时，常规污染物去除率显著降低。 A/O 系统对 TC 的总体去除效果较为平稳，总去除率在 84.8%~94.7% 之间。相比好氧段，TC 对厌氧段运行效果的影响较为显著，表明 TC 对厌氧微生物具有明显的抑制作用。TC 经 A/O 系统活性污泥生 物降解主要有两种降解产物均为 TC 的脱水产物，并无很大毒性。 （2）采用 qPCR 对污泥样品中 7 种目标 TET-ARGs（tetA、 tetC、tetG、tetM、tetO、tetW、tetX）、16S rRNA 以及 integron I 进 行检测，所有目标 TET-ARGs 在厌氧段和好氧段中均有被检出。厌 氧段活性污泥中 TET-ARGs 的浓度明显高于好氧段活性污泥中 TET- ARGs 的浓度 。厌氧段 TET-ARGs 浓度范 围为 9.56×104 copies/g （tetM）~1.03×107 copies/g（tetC），TET-ARGs 存在规律为：tetC ＞tetA＞tetO＞tetG＞tetW＞tetX＞tetM。好氧段 TET-ARGs 浓度范围 为 8.11×102 copies/g（tetW）~2.05×106 copies/g（tetA），TET-ARGs 存在规律为：tetC＞tetG＞tetA＞tetM＞tetO＞tetX＞tetW，核糖体保 护机制的 TET-ARGs（tetM、tetO 和 tetW）浓度均较低，表明其演 变繁殖在好氧环境条件下受到抑制。 PAGE PAGE III （3）TC 可诱导 TET-ARGs 产生和变化，本研究发现投加 TC 对厌氧活性污泥和好氧活性污泥中的 TET-ARGs 造成了不同的影 响。采用皮尔逊相关性分析 TET-ARGs 的相对表达量与 TC 之间的 关系。在厌氧段中，tetC、tetG 和 tetM 与 TC 呈现出显著的正相关性 （0.964≤r≤0.991，P0.05）；在好氧段中，仅 tetG 与 TC 呈现出显 著的正相关性（r=0.961，P0.05）。表明 TC 的存在对 tetC、tetG 和 tetM 的产生和演变具有一定的选择性压力。A/O 系统对 tetA 去除效 果显著，且 tetA 对 TC 的压力作用比较不敏感，高浓度 TC 对 tetA 会 产生压力影响。 （4）整合子是细菌抗药性迅速产生和迁移的重要原因之一。本 研究对 A/O 系统中厌氧段和好氧段 TET-ARGs 与 I 类整合子之间的 相关性进行分析，在厌氧段中，tetC、tetG、tetM 与 I 类整合子呈现 显著正相关性（0.824≤r≤0.916，P0.05）；在好氧段中，仅 tetA 与 I 类整合子之间存在显著正相关性（r=0.587，P0.05）。TET-ARGs 之间也存在着一定的相互关联。但 TET-ARGs 相互之间关系较为复 杂，在不同环境中表现的相关性不尽相同，同一抗性机制的 TET- ARGs 之间存在的相互关系更为显著。 （5 ）高通量测序结果 表明， A/O 系统中 厌氧段优势 菌 属为 Proteobacteria、Bacteroidetes 和 Firmicutes，好氧段的优势菌属为 Proteobacteria 和 Bacteroidetes。TC 的投加对 A/O 系统微生物群落结 构产生了一定影响。低浓度的 TC 对细菌